Question

某实验研究发现：用人的体细胞与小鼠体细胞进行杂交得到的杂种细胞含有双方的染色体．杂种细胞在持续分裂过程中仅保留小鼠的染色体而人的染色体会逐渐丢失，最后只剩一条或几条．如图示意人的缺乏HGPRT酶的突变细胞株（HGPRT^-）和小鼠缺乏TK酶的细胞株（TK^-）融合并在HAT培养液中培养的简要过程．实验显示，人的染色体在融合细胞中仅存3号或17号染色体或两者都有．已知只有同时具有HGPRT酶和TK酶的融合细胞才可在HAT培养液中长期存活与繁殖．

（I）体细胞杂交克服了

 

．的障碍，过程①可用到的不同于植物细胞融合的方法是

 

，细胞融合体现了细胞膜具有

 

的结构特点．
（2）过程②中，为防止细菌污染，应向培养液中添加一定量的

 

；此外，还要定期用

 

等处理细胞，使贴壁生长的细胞脱落形成细胞悬液．
（3）从培养过程看，HAT培养液不仅能提供营养，还可起到

 

作用．
（4）分析图示结果，可确定人的

 

基因位于

 

号染色体上．

Answer 1

考点：动物细胞工程的常用技术,动物细胞与组织培养过程

专题：

分析：根据题意可以看出，该技术可以对人的TK酶基因进行定位．该技术中利用了细胞融合、动物细胞培养等技术，动物细胞培养的条件有：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物；（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清等天然物质；（3）适宜的温度和PH；（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO₂．

解答： 解：（1）体细胞杂交打破了生殖隔离，克服了远缘杂交不亲和的障碍，动物细胞融合的方法中常用的生物法为灭活的仙台病毒诱导，体现细胞膜具有流动性．
（2）在动物细胞培养过程中，为了防止细菌的污染，培养液应该添加一定量的抗生素．由于动物细胞具有接触抑制的现象，因此要定期用胰蛋白酶处理细胞，使贴壁生长的细胞脱落形成细胞悬液．
（3）根据题意可知，“只有同时具有 HGPRT 酶和 TK 酶的融合细胞才可在 HAT 培养液中长期存活与繁殖”，因此HAT 培养液不仅能提供养料，还起选择（筛选）作用．
（4）从培养结果可以看出，培养获得的细胞中均具有鼠的全部染色体，但是只有含人的17号染色体的细胞存活下来，由此可得，人的TK酶基因位于17号染色体．
故答案为：
（ l ）远缘杂交不亲和（或生殖隔离） 用灭活的（仙台/动物）病毒诱导融合    流动性
（ 2 ）抗生素   胰蛋白酶
（ 3 ）选择（筛选）
（ 4 ） TK酶  17

点评：本题考查动物细胞融合、动物细胞培养以及基因定位的相关知识，意在考查考生的识记能力、图文转换能力和理解能力，难度适中，只要记住相关知识点即可得出正确答案．