Question

（15分）生物兴趣小组试图探究牛和山羊的瘤胃中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如表所示，实验步骤如图所示。请分析回答问题：

KH2PO4	1.4g
Na2HPO4	2.1g
MgSO4·7H2O	0.2g
葡萄糖	10g
尿素	1g
琼脂	15g
溶解后自来水定容到1000mL

（1）培养基中加入尿素的目的是 ，原理是 。从同化作用类型来看的，该菌属于 。

（2）实验需要振荡培养，原因是 。转为固体培养时，常采用 的方法接种，获得单菌落后继续筛选。

（3）在实验过程中：①培养基、培养皿；②玻棒、试管、锥形瓶、吸管；③瘤胃中液体。其中需要灭菌是 （填序号）。

（4）分离分解尿素的细菌实验时，甲同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。甲同学实验结果差异的原因可能有 （填序号）①取样不同 ②培养基污染 ③操作失误 ④没有设置对照

（5）以尿素为唯一氮源的培养基培养“目的菌”后，加入 指示剂后变红色，说明“目的菌”能分解尿素。理由是 。

（6）为进一步确定取自瘤胃中液体的适当稀释倍数，将接种的培养皿放置在37°C恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计具有红色环带的菌落数，结果如下表，其中 倍的稀释比较合适。

稀释倍数	103	104	105	106	107
菌落数	>500	367	248	36	18

Answer 1

（15分，除注明外，每空1分）

（1）筛选目的菌 只有能合成脲酶的细菌才能分解尿素，在该培养基上生长（2分） 异养型

（2）为目的菌提供氧气 涂布平板法 （3）①和②（2分） （4）①②③（2分）

（5）酚红指示剂 细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，PH增高，使酚红指示剂变红（2分）

（6）106或105（2分）

【解析】

试题分析：（1）加入尿素的目的是筛选能高效降解尿素的目的菌，其原理是：只有能合成脲酶的细菌才能分解尿素，在以尿素为氮源的培养基上生长。培养基中的碳源为葡萄糖，所以，该菌的同化作用类型为异养型。

（2）振荡培养的目的是为目的菌提供氧气。转为固体培养时，欲获得单菌落，依图示信息可以推出，常采用的接种方法是涂布平板法。

（3）在实验过程中，为了防止杂菌污染，需要对培养基、培养皿、玻棒、试管、锥形瓶、吸管等进行灭菌，即需要对①和②灭菌。

（4）在实验时，如果取样不同、培养基污染、操作失误即①②③等都会导致分离筛选的菌落数多。

（5）“目的菌”合成的脲酶将培养基中的尿素分解成氨，氨可使培养基的碱性增强，使酚红指示剂变红。

（6）表中数据显示，稀释倍数为106和105时，得到的菌落数分别是36个和248个，因此106或105倍的稀释比较合适。

考点：本题考查微生物的培养和分离的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。