Question

7．随着现代生物科学技术的发展，转基因生物越来越多．下面是转基因猕猴的培育过程．请据图回答有关的问题．

（1）基因表达载体导入成纤维细胞的常用方法是显微注射法．在基因表达载体中，绿色荧光蛋白基因前端必须有启动子．
（2）检测绿色荧光蛋白基因是否整合到猕猴的成纤维细胞DNA分子上的方法是DNA分子杂交，从分子水平检测绿色荧光蛋白基因是否在受体细胞成功翻译的技术是抗原-抗体杂交．
（3）在③过程培养重组细胞时，培养液中通常加入抗生素的目的是防止培养液被污染，培养液含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生索和动物血清等．
（4）质粒上标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因．
（5）图中的过程④称为胚胎移植，为使代孕猕猴与供体雌猕猴生殖器官的生理变化相同，此前需对代孕雌猴作同期发情处理．
（6）在转基因猕猴的培育过程中及的动物细胞工程技术有动物细胞培养、体细胞核移植技术．

Answer 1

分析 1、分析题图：图示为转基因猕猴的培育过程示意图，其中①表示基因表达载体的构建过程；②表示转基因动物细胞培养和选择的过程；③表示表示早期胚胎培养；④表示胚胎移植．
2、标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．单克隆抗体制备的两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群．
3、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）将重组质粒导入动物细胞时，一般采用显微注射技术；基因表达载体中应含有绿色荧光蛋白基因（目的基因），启动子、终止子和标记基因，故绿色荧光蛋白基因前端必须有启动子．
（2）检测绿色荧光蛋白基因是否整合到猕猴的成纤维细胞DNA分子上的方法可用DNA分子杂交，从分子水平检测绿色荧光蛋白基因是否在受体细胞成功翻译的技术是抗原-抗体杂交，检测是否产生了荧光蛋白．
（3）细胞培养时，培养液中通常加入抗生素的目的是防止培养液被污染，培养液含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生索和动物血清等．
（4）标记基因的作用是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．
（5）图中的过程④称为胚胎移植，为使代孕猕猴与供体雌猕猴生殖器官的生理变化相同，此前需对代孕雌猴作同期发情处理．
（6）在转基因猕猴的培育过程中及的动物细胞工程技术有动物细胞培养、体细胞核移植技术．
故答案为：
（1）显微注射法  启动子
（2）DNA分子杂交  抗原-抗体杂交 
（3）防止培养液被污染  动物血清 
（4）鉴别受体细胞中是否含有目的基因 
（5）胚胎移植  同期发情 
（6）动物细胞培养、体细胞核移植技术

点评 本题考查基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记核移植的具体过程；胚胎移植的基本程序；识记基因工程的具体操作步骤，掌握各步骤中的细节，能结合所学的知识准确答题．