Question

苏云金杆菌（Bt）能产生具有杀虫能力的毒素蛋白．图1是转Bt毒素蛋白基因植物的重组DNA形成过程示意图；图2是毒素蛋白基因进入植物细胞后发生的两种生物大分子合成的过程，据图回答下列问题．

（1）将图1①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有

 

种DNA片段．过程②需要用到

 

酶．
（2）假设图1中质粒原来BamHⅠ识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶BclⅠ的碱基序列，现用BclⅠ和HindⅢ切割质粒，则该图1中①的DNA右侧还能选择BamHⅠ进行切割，并能获得所需重组质粒吗？并请说明理由

 

．
（3）若上述假设成立，并成功形成重组质粒，则重组质粒

 

A．既能被BamHⅠ也能被HindⅢ切开
B．能被BamHⅠ但不能被HindⅢ切开
C．既不能被BamHⅠ也不能被HindⅢ切开
D．能被HindⅢ但不能被BamHⅠ切开
（4）图2中α链是

 

．不同组织细胞的相同DNA进行过程③时启用的起始点

 

（在“都相同”、“都不同”、“不完全相同”中选择），其原因是

 

．
（5）要想检测导入的Bt毒素蛋白基因是否表达，在分子水平上可用

 

法进行检测，如果出现杂交带，说明目的基因已经表达蛋白质产品，转基因植物培育成功．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,遗传信息的转录和翻译

专题：

分析：1、由于HindⅢ与BamHⅠ两种限制酶酶切形成的黏性末端不一样，图中①中的DNA同时被这两种限制酶切割后产生四种基因片段，即_B、HB、BH、B_ （H表示HindⅢ，B表示BamHⅠ）．
2、图2表示基因的表达，DNA转录形成信使RNA（α链），翻译形成多肽链．

解答： 解：（1）图中①的DNA含有两个BamHⅠ酶的切割位点，含有一个HindⅢ酶的切割位点，所以用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切①中的DNA后，反应管中有4种DNA片段．
（2）据图分析，由于BamHⅠ和BclⅠ切割DNA后露出的黏性末端相同，质粒原来BamHⅠ识别位点的碱基序列变为限制酶BclⅠ的碱基序列，用BclⅠ和HindⅢ切割质粒，用BamHⅠ和HindⅢ切割目的基因，仍能获得重组质粒．
（3）质粒和目的基因都被HindⅢ切割，形成相同的黏性末端，则形成的重组质粒还能被HindⅢ切割；质粒原来BamHⅠ识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶BclⅠ的碱基序列，则形成的黏性末端是
T
ACTAG，而目的基因被BamHⅠ切割，则形成的黏性末端
G
CCTAG，
则形成的重组DNA片段是
TGATCC
ACTAGG，则不能被BamHⅠ识别，也不能切割．
根据酶切位点和识别的碱基序列可知，重组质粒只能被能被HindⅢ但不能被BamHⅠ切开．
（4）从图2可知，a链形成是以DNA一条链作为模板进行转录形成的信使RNA分子；不同组织细胞的相同DNA在转录时，如果是相同基因一般转录起点相同，不同的基因转录起点不同，原因是基因的选择性表达．
（5）检测目的基因是否在受体细胞内表达的分子水平上的检测是向分泌物中加入抗体，通过抗原-抗体特异性结合形成杂交带加以检测，如果能形成说明表达，如果不能形成说明没有表达．
故答案为：
（1）4   DNA连接酶   
（2）能，切割后露出的黏性末端相同
（3）D
（4）mRNA  不完全相同   不同组织细胞中基因会进行选择性表达
（5）抗原-抗体杂交

点评：本题以转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图为载体，考查基因工程的相关知识，意在考查考生的识图能力、理解能力和应用能力，属于中等难度题．