Question

【题目】随着全球气候变暖，冻土融化，很多年前被埋起来的古细菌如炭疽杆菌孢子可能被释放出来。炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列，菌落呈卷发状，可引起一种人畜共患传染病——炭疽病。对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的宿主专一性，通过实验确诊。

（1）细菌培养：

①为从炭疳病疑似患者体内分离出炭疽杆菌，将采集到的患者皮肤脓胞渗出物稀释后滴于培养基表面，用涂布器涂匀，这种接种方法称为_________________________。

②用该方法统计样本菌落数时是否需要对照组？___________________。为什么__________________。

（2）细菌鉴定：实验流程如图所示。

①挑选可疑菌落制片后，用显微镜观察，可看到呈竹节状排列的杆菌。

②对配制的液体培养基等需采取高压蒸汽灭菌：实验所用液体培养基的碳源为_____________（填“无机碳”或“有机碳”）。

③接种可疑菌后，35℃培养24h，液体培养基变浑浊，原因是________________________，对照组试管中应加入_____________，与实验组同时培养6h后，若实验组液体培养基的浑油度比对照组_________（填“高”或“低”），则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。

（3）对排除的疑似患者及易感人群，可接种炭疽杆菌疫苗，剌激机体产生相应抗体。与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外，还有_____________和_____________。

Answer 1

【答案】 稀释涂布平板法 需要 因为需要判断培养基是否被杂菌污染（培养基灭菌是否合格） 有机碳 细菌大量繁殖 等量生理盐水 低 吞噬细胞 浆细胞（效应B细胞）

【解析】试题分析：本题考查微生物的相关知识点，考查的知识点有微生物的培养、以及实验设计。微生物培养基的基本成分：水、无机盐、碳源、氮源及特殊生长因子；无菌操作，包括灭菌和消毒两种方式；微生物的接种：微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，常用来统计样品活菌数目的方法是稀释涂布平板法。

（1）①微生物常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，后者需要将采集到的患者皮肤脓胞渗出物稀释后滴于培养基表面，并用涂布器涂匀。

②用该方法统计样本菌落数时需要设置对照组，以判断培养基是否被杂菌污染（培养基灭菌是否合格）。

（2）②炭疽杆菌是异养微生物，因此实验所用液体培养基的碳源为有机碳。

③接种可疑菌后，35℃培养24小时，细菌大量繁殖，导致液体培养基变浑浊；根据实验的单一变量原则，对照组试管中应加入等量生理盐水，与实验组同时培养6小时后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组低，则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。

（3）对排除的疑似患者及易感人群，可接种炭疽杆菌疫苗，刺激机体产生相应抗体，与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外，还有吞噬细胞、效应B细胞。