Question

9．如图为分离微生物的流程示意图，请据图回答问题：

（1）绝大多数细菌分布在距地表约3～8cm的土壤层，因此，土壤取样时，一定要铲去表层土；要分离土壤中分解纤维素的细菌，可以选择纤维素丰富的环境，如树林中多年落叶形成的腐殖土．
（2）微生物培养时，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目．
（3）若要对分离的细菌做进一步的鉴定，还需借助物理化学的方法：若要鉴定是否有分解尿素的细菌，可以在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，说明培养基的PH升高，这样可以鉴定这种细菌可以分解尿素；若要鉴定是否有分解纤维素的细菌，在长出菌落的培养基上，覆盖刚果红染液，10～15min后，倒去该染液，再加入1mol/L的NaCl溶液，15min后，也倒去该溶液，若菌落的周围出现透明圈，说明此细菌能分解纤维素．
（4）在10⁵稀释度下求出3个平板上菌落数的平均值为63，那么，每克样品中的菌落数为6.3×10⁷．

Answer 1

分析 刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌．
由于细菌分解在尿素的过程中合成脲酶，脲酶将尿素分解成氨，会使培养基碱性增强，PH升高，所以可以用检测pH的变化的方法来判断尿素是否被分解，可在培养基中加入酚红指示剂，尿素被分解后产生氨，PH升高，指示剂变红．

解答 解：（1）分析题意可知，绝大多数细菌分布在距地表约3～8cm的土壤层，因此，土壤取样时一定要铲去表层土壤；要分离土壤中分解纤维素的细菌，可以选择富含纤维素的环境．
（2）微生物培养时，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目．
（3）若要鉴定是否有分解尿素的细菌，可以在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，说明培养基的PH升高，这样可以鉴定这种细菌可以分解尿素；若要鉴定是否有分解纤维素的细菌，在长出菌落的培养基上，覆盖刚果红染液，10～15min后，倒去该染液，再加入1mol/L的NaCl溶液，15min后，也倒去该溶液，若菌落的周围出现透明圈，说明此细菌能分解纤维素．
（4）在10⁵稀释度下求出3个平板上菌落数的平均值为63，那么，每克样品中的菌落数=63÷0.1×10⁵=6.3×10⁷个．
故答案为：
（1）表层土　纤维素丰富
（2）菌落数目稳定　因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目
（3）酚红　升高　刚果红　透明圈
（4）6.3×10⁷

点评 本题考查了微生物的分离和培养的有关知识，要求考生掌握利用培养基对微生物进行选择和鉴定的方法和原理，能结合所学的知识准确答题．