Question

6．如图表示利用胚胎干细胞（简称ES细胞）所作的一系列研究，请据图分析回答：

（1）过程Ⅰ中褐毛基因转图胚胎干细胞前需要构建重组DNA（或重组载体），需要的工具酶是限制酶、DNA连接酶；
（2）过程Ⅰ表示胚胎干细胞的体外培养，在培养液中需要加入水、无机盐、葡萄糖、氨基酸以及天然成分动物血清
等物质，通过培养将获得遗传物质稳定的正常细胞群，称之为细胞株（细胞株/细胞系）．
（3）过程Ⅱ表示将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔，通过组织化学染色，用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响的因素，这项研究利用了胚胎干细胞具有发育的全能性的特点．在哺乳动物胚胎发育过程中，囊胚将进一步发育成原肠胚．
（4）克隆转基因小鼠常用的技术手段有核移植、细胞培养和胚胎移植．

Answer 1

分析 分析题图：过程I采用基因工程技术将褐毛基因转入胚胎干细胞；过程II表示胚胎干细胞的体外培养；过程III中，将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔，通过组织化学染色，用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响的因素．

解答 解：（1）过程Ⅰ中的褐毛基因转入胚胎干细胞前需构建基因表达载体．构建基因表达载体时，需限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，还需DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子．
（2）动物细胞培养的培养液中，除了要加入水、无机盐、葡萄糖、氨基酸等营养物质外，通常还需加入动物血清等天然成分．通过培养将获得遗传物质稳定的细胞群体，该细胞群体称为细胞株．
（3）ES细胞能培养成小鼠个体，说明胚胎干细胞具有发育的全能性．在哺乳动物胚胎发育过程为：受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚期→原肠胚→个体，可见，囊胚将进一步发育成原肠胚．
（4）从体细胞培养成克隆转基因小鼠，需采用核移植技术，并进一步通过细胞培养、胚胎移植来实现．
故答案：
（1）重组DNA（或重组载体） 限制酶、DNA连接酶
（2）动物血清  细胞株
（3）发育的全能性   原肠胚
（4）核移植     胚胎移植

点评 本题结合流程图，考查基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关知识，意在考查考生的识图能力和识记能力，难度不大．