Question

人类细胞内有相当于R的结构，它就是位于线粒体中的mtDNA．若用两种识别切割序列完全不同的限制酶，M和N切割线粒体mtDNA，通过凝胶电泳分离分析得下表．限制酶M和N的识别序列和切割位点如图．

凝胶电泳结果 （1kb=1000对碱基）（+表示该片段的存在以及含量）
分子量（kb）	酶M	酶N	酶M+酶N	分子量（kb）	酶M	酶N	酶M+酶N
1.0	+		+	6.0			+
2.0			+	7.0		+
3.0			+	9.0		+
4.0			+	10.0	+
5.0	+

（1）该mtDNA的长度为

 

kb．在该DNA分子中，M酶与N酶的切割位点分别有

 

个．
（2）M酶与N酶切出的能相互粘连的末端能在

 

酶的作用下相互连接，请将连接的结果表示出来：

 

．连接后的序列是否可以用M酶、N酶进行切割，并简述理由：

 

．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：分析表格和审清题意是解答本题的切入点．题干中提出，mtDNA是存在于人类细胞线粒体中双链闭合环状的DNA分子，因此限制酶在切割时，用酶M得到3个片段，则有3个切点，用酶N得到2个片段，则有2个切点．图1中可以看出，两种限制酶切割形成的黏性末端相同，因此可以在DNA连接酶的作用下相互连接．由于酶的专一性，连接后不能再用M酶、N酶进行切割，因为连接后的序列不是M酶和N酶所能识别的特定的碱基序列．

解答： 解：（1）该mtDNA为环状DNA，用酶M得到3个片段，则有3个切点，用酶N得到2个片段，则有2个切点．用酶N切割得到2个片段的长度分别为7和9，则该mtDNA的长度为16Kb．
（2）M酶和N酶切割能得到相同的黏性末端，可以用DNA连接酶催化连接；结合图1可知，连接后的结果为．当连接后，没有了M酶和N酶所能识别的特定的碱基序列，因此两种酶不能再切割了．
故答案为：
（1）16        3、2
（2）DNA连接酶

否，连接后的序列不是M酶和N酶所能识别的特定的碱基序列

点评：本题结合图表，考查基因工程的原理及技术，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各步骤的细节，能结合图中和表中信息准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．