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    13．酵母菌在缺氧、pH为．4.5-6.0的条件下生长繁殖，而绝大多数其它微生物都因无法适应这一环境而受到抑制．某同学用果园土为实验材料，从土壤中分离纯化酵母菌．实验步骤如下：
    ①土壤取样、制备样品液；
    ②配制培养基并灭菌、制作平板若干；
    培养基A：PH为5.0的乳酸马铃薯葡萄糖琼脂培养基
    培养基B：PH为5.0的乳酸马铃薯葡萄糖培养液
    ③用无菌吸管取样品液1ml，注入到有30ml培养基B的锥形瓶中，在30℃、无氧环境中培养24h；
    ④24h后，用另一支无菌吸管从锥形瓶中取培养液0．lml，分别接种到若干培养基A的平板上，倒置于37℃的恒温箱中培养48小时；
    ⑤镜检、菌种保藏．
    请回答下列问题：
    （1）根据实验结果，判断酵母菌的呼吸方式为兼性厌氧型．
    （2）第②步配制的培养基，常采用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌．
    （3）第③步实验操作是否具有选择作用，有，说明理由无氧、乳酸的酸性条件可以抑制其它微生物的生长，而酵母菌生长繁殖．
    （4）第④步的接种方法稀释涂布平板（或涂布平板）．
    （5）某同学欲测定样品液中酵母茁数量，采用显微镜直接计数方便快捷并且仪器损耗较小．这样得出的结果往往比实际值偏高（填“偏高”、“基本不变”“偏低”），理由是计算时也包括了酵母菌死细胞（以及微小杂物）．

    分析 1、酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～25℃，其代谢类型属于兼性厌氧型，在有氧的条件下能够有氧呼吸大量繁殖，无氧条件下无氧呼吸产生酒精和二氧化碳．
    2、两种纯化细菌的方法的比较

     优点缺点适用范围
    平板划
    线分离法    		可以观察菌落特征，对混合菌进行分离不能计数适用于好氧菌
    稀释涂布
    平板法    		可以计数，可以观察菌落特征吸收量较少，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延适用于厌氧，兼性厌氧

    解答 解：（1）根据实验步骤可知，步骤③中“无氧环境中培养24h”，说明酵母菌能够进行无氧呼吸，而步骤④中“倒置于37℃的恒温箱中培养48小时”，说明酵母菌能够进行有氧呼吸．
    （2）培养基常采用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌．
    （3）第③步中无氧、乳酸的酸性条件可以抑制其它微生物的生长，而酵母菌生长繁殖，因此该实验操作具有选择作用．
    （4）根据实验操作步骤可知，第④步的接种方法．
    （5）采用显微镜直接计数时，将活的酵母菌和死的酵母菌全部计数在内，因此该方法得出的结果往往比实际值偏高．
    故答案为：
    （1）兼性厌氧型
    （2）高压蒸汽灭菌
    （3）有
    无氧、乳酸的酸性条件可以抑制其它微生物的生长，而酵母菌生长繁殖
    （4）稀释涂布平板（或涂布平板）
    （5）偏高       计算时也包括了酵母菌死细胞（以及微小杂物）

    点评 本题考查微生物分离和培养，要求考生掌握选择培养基的特点，识记分离和纯化微生物常用的两种方法，掌握采用稀释涂布平板法计数微生物的具体过程，能结合所学的知识准确答题．

    练习册系列答案
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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    3．下列有关乳酸菌的叙述，正确的是（　　）
    A．从生命系统的结构层次来看，既是细胞层次也是个体层次
    B．具有与酵母菌结构相似的细胞膜，其细胞器中A和T的数量相等
    C．观察其染色体形态结构和数目最佳的时期是有丝分裂中期
    D．细胞的体积越大，相对表面积就越大，物质运输的效率就越高

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    4．图甲表示某动物精巢内细胞分裂不同时期核内DNA数量变化的关系，图乙表示处于细胞分裂不同时期的细胞图象．请据图分析回答下面的问题：

    （1）图甲中b-c、f-g阶段形成的原因是DNA复制．
    （2）图乙中，A图细胞内含有染色单体4条，染色体数与DNA分子数之比为1：2．
    （3）图乙中，D图细胞含有同源染色体0对，其细胞名称为次级精母细胞．

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    1．免疫脂质体是将抗体通过聚合物结合在脂质体（双层磷脂分子构成）上构建而成的，它利用抗体特异性靶向作用，与肿瘤细胞表面的抗原结合，将脂质体包裹的药物送达病灶部位．这为乳腺癌的治疗提供了一种新途径．
    （1）人类表皮生长因子受体-2（HER2）基因在乳腺癌发生早期具有高表达现象，提高了乳腺癌细胞的转移潜能．研究人员将HER2作为抗原刺激小鼠产生特异性（体液）免疫反应，获取免疫细胞后，制备单克隆抗体TMAB，其通过阻断人类表皮生长因子在HER2上的附着，产生抗肿瘤的效应．
    （2）阿霉素是一种脂溶性小分子，可通过自由扩散方式进入细胞，抑制细胞增殖，但其毒副作用较大，利用脂质体将其包裹，通过缓释可以降低药物对机体的毒副作用．
    （3）研究者将TMAB与包含阿霉素的脂质体融合，制备出新型的抗乳腺癌药物阿霉素免疫脂质体．为确定其作用效果，测定了不同条件下阿霉素进入细胞的量，实验设计及结果如下．
    组别阿霉素阿霉素脂质体阿霉素免疫脂质体HER2基因高表达的乳腺癌细胞
    a+--+
    b-+-+
    c--++
    注：+表示添加；-表示不添加

    和阿霉素脂质体相比，阿霉素免疫脂质体的药物入胞量更高．但a组阿霉素进入细胞的量最高，原因是阿霉素是脂溶性小分子，在a组中以自由扩散的方式进入细胞，速度较快，相同时间内进入细胞的量较多．
    （4）为确认阿霉素免疫脂质体的靶向性，研究者设计以下实验，并测定了各组阿霉素进入细胞的量．实验中利用的a是HRE2基因不（低）表达的乳腺癌细胞（乳腺细胞）细胞，若第2组的阿霉素入胞量明显高于其他组，说明阿霉素免疫脂质体具有靶向性．
    组别阿霉素脂质体阿霉素免疫脂质体HER2基因高表达的乳腺癌细胞a细胞
     ①+-+-
     ②-++-
     ③+--+
     ④-+-+
    注：+表示添加；-表示不添加．

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    8．胡萝卜素作为一种重要的天然色素在人们的日常生活中有着广泛的应用，在胡萝卜素的多种生产方式中，使用三孢布拉氏霉菌进行发酵生产的方法，以及产品的高纯度、无毒副作用及绿色环保等优点受到人们的广泛重视．请回答下列问题：
    （1）用平板划线法纯化三孢布拉氏霉菌，通常使用的划线工具是接种环，其灭菌方法是灼烧灭菌．划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断的长满了菌，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落．造成划线无菌落可能的操作失误有接种环灼烧后未冷却或划线未从第一区域末端开始．
    （2）常用稀释涂布平板法法进行活菌计数，但统计的菌落数往往比活菌实际数目低．
    （3）不同的材料选用的提取方法不同，根据胡萝卜素具有易溶于有机溶剂的特点．常用萃取法提取胡萝卜素．提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和时间以防止胡萝卜素分解．
    （4）提取的胡萝卜素样品通过纸层析法法进行鉴定，确定是否提取到胡萝卜素．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    18．为了验证在有丝分裂过程中，染色体上的两条姐妹染色单体之间也可能发生部分交换，将植物分生区细胞置于含有BrdU的培养基中让其不断增殖，并在显微镜观察不同细胞周期的中期细胞．原理是DNA复制时BrdU可代替胸腺嘧啶脱氧核苷酸掺入到DNA子链中，经特殊染色后，DNA的一条单链掺有BrdU着色深，而DNA的两条单链都掺有BrdU则着色浅．下列说法正确的是（　　）
    A．若不发生部分交换，第一次分裂中期两条姐妹染色单体，一条着色较深，另一条较浅
    B．若不发生部分交换，第二次分裂中期两条姐妹染色单体，一条着色较深，另一条较浅
    C．若第一次分裂前期发生部分交换，则中期着色较浅的染色单体上一定有着色较深的部分
    D．若第二次分裂前期发生部分交换，则中期着色较深的染色单体上不会有着色较浅的部分

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    科目：高中生物 来源：2016届江苏省文创教育高三3月春季强化班调研测试生物试卷（解析版） 题型：综合题

    以下是与高中生物实验有关的内容。请回答以下问题：

    ①生物组织中还原糖的鉴定 ②生物组织中脂肪的鉴定 ③生物组织中蛋白质的鉴定 ④观察植物细胞的质壁分离和复原 ⑤叶绿体中色素的提取和分离 ⑥比较过氧化氢酶和Fe3+ 的催化效率 ⑦观察根尖分生组织细胞的有丝分裂 ⑧ 探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用

    （1）在上述实验过程中，必须借助显微镜才能完成的是 ，需要水浴加热的是 ，需要用颜色确定的是 （以上均填标号）。

    （2）由于实验材料用品或试剂所限，有时候需要设法替代，下列各项处理中正确的

    是

    A．做⑦实验时，可用蒜叶代替洋葱根尖

    B．做④实验时，可用鸡血红细胞代替紫色洋葱表皮细胞

    C．做⑤实验时，可用干净的细沙代替二氧化硅

    D．做③实验时，可用龙胆紫代替苏丹Ⅲ染液

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    科目：高中生物 来源：2016届江苏省文创教育高三3月春季强化班调研测试生物试卷（解析版） 题型：选择题

    下列关于基因工程的叙述，错误的是（ ）

    A．目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物

    B．限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶

    C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性

    D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    1．下列关于运载体的叙述中，不正确的是（　　）
    A．运载体与目的基因结合后，得到的是一个重组DNA分子
    B．在运载体上，要有多种限制酶的切点
    C．目前最常用的有质粒、噬菌体和动植物病毒
    D．具有某些标记基因，便于对其进行切割

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