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8.随着社会的发展,石油产品的使用越来越多,石油烃污染也越来越严重.为了筛选出分解石油烃能力强的微生物,人们不断地进行研究.如图为获取能分离出分解石油烃的微生物的土壤样品后的研究过程,请回答有关问题:

(1)获取土壤样品的取样地点最好选在石油烃污染明显处.为了能有效地分离出分解石油烃的微生物,过程①④所用的选择培养基只能以石油烃作为唯一碳源,其原因是只有能利用石油烃的微生物能正常生长繁殖.
(2)根据⑤平板上生长的菌落,对④进行接种采用的方法是涂布分离,若发现在⑤中无法区分菌落,可以将图中③取出的菌液进行(梯度)稀释.
(3)纯化菌株时,通常使用的划线工具是接种环.采用灼烧方法对其进行灭菌.划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落.造成划线无菌落可能的操作失误是接种环灼烧后未冷却;划线未从第一区域末端开始划线(写出一点即可).

分析 (1)培养基的营养构成:各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐.培养基的分类:①按物理性质分,分为液体培养基和固体培养基,固体培养基中含有凝固剂,一般是琼脂.②按化学成分分,分为天然培养基和合成培养.两者的区别是天然培养基成分不确定,合成培养基成分的含量是确定的.③按用途分,分为选择培养基和鉴别培养基.选择培养基主要是培养、分离特定的微生物,培养酵母菌可在培养基中加入青霉素;鉴别培养基可以鉴定不同的微生物,比如鉴别饮用水中是否含有大肠杆菌,可以用伊红-美蓝培养基,如果菌落呈深紫色,并带有金属光泽,说明有大肠杆菌.
(2)常用灭菌方法:灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法.
培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次:高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、化学消毒、紫外线灭菌、巴氏消毒法.
(3)接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法.接种的目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞,并在培养基表面形成单个细菌繁殖而成的子细胞群体--菌落.

解答 解:(1)要获取相应的菌种,应到相应的环境中获取,获取土壤样品的取样地点最好选在石油污染明显处.有些培养基可以抑制其他微生物的生长,这样的培养基可称做选择培养基.因此,为了能有效地分离出分解石油烃的微生物,过程①一④所用培养基,其成分的特点是只含石油烃一种碳源,从而有利于目的菌的生长,抑制其他微生物的生长.
(2)④中的培养基从物理特征看属于固体培养基,可加入凝固剂琼脂处理,常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法.根据⑤平板上生长的菌落,对④进行接种采用的方法是涂布分离.若⑤中发现无法区分菌落,说明稀释度不够,可以将重新进行梯度稀释.
(3)纯化菌株时,通常使用的划线工具是接种环.采用灼烧方法对其进行灭菌.划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落.造成划线无菌落可能的操作失误是接种环灼烧后未冷却;划线未从第一区域末端开始划线.
故答案为:
(1)石油烃污染明显处     只有能利用石油烃的微生物能正常生长繁殖
(2)涂布分离    进行(梯度)稀释
(3)接种环    灼烧   接种环灼烧后未冷却;划线未从第一区域末端开始划线

点评 本题的知识点是微生物培养过程中的无菌技术,分离微生物的常用的接种方法和接种工具,主要考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力.

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