Question

5．下列是有关血红蛋白的提取与分离的问题，请回答：
（1）凝胶色谱法，是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法．所用的凝胶实际上是一些微小的多孔球体．
（2）实验前取新鲜的血液，切记要预先加入柠檬酸钠，加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固．蛋白质的提取和分离实验中，首先要用生理盐水（填写溶液名称）洗涤红细胞，其目的是去除杂蛋白．
（3）在蒸馏水和甲苯的作用下，红细胞破裂，释放出血红蛋白．用（高速）离心法可分离出血红蛋白．
（4）取血红蛋白溶液装入透析袋，再将透析袋放入pH为7.0的（磷酸）缓冲液中，透析12h透析的目的是去除分子质量较小的杂质．透析的原理是透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内．
（5）人们用鸡的红细胞提取DNA，用人的红细胞提取血红蛋白，其原因是鸡红细胞具有细胞核，含有DNA，适合用于提取DNA；人红细胞无细胞核，且血红蛋白含量丰富，适合用于提取血红蛋白．

Answer 1

分析 血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有：
（1）样品处理：①红细胞的洗涤，②血红蛋白的释放，③分离血红蛋白．
（2）粗分离：①分离血红蛋白溶液，②透析．
（3）纯化：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质．
（4）纯度鉴定--SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳．

解答 解：（1）凝胶色谱法是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法．所用的凝胶实际上是一些微小的多孔球体．
（2）实验前取新鲜的血液，要预先加入柠檬酸钠防止血液凝固．蛋白质的提取和分离实验中，首先要用生理盐水洗涤红细胞，其目的是去除杂蛋白．
（3）在蒸馏水和甲苯的作用下，红细胞破裂，释放出血红蛋白．用（高速）离心法可分离出血红蛋白．
（4）取血红蛋白溶液装入透析袋，再将透析袋放入pH为7.0的 （磷酸）缓冲液中，透析12h透析的目的是去除分子质量较小的杂质．透析的原理是透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内．
（5）鸡红细胞具有细胞核，含有DNA，适合用于提取DNA；人红细胞无细胞核，且血红蛋白含量丰富，适合用于提取血红蛋白．
故答案为：
（1）相对分子质量大小    微小的多孔球体 
 （2）防止血液凝固      生理盐水    杂蛋白  
（3）蒸馏水和甲苯    （高速）离心  
（4）（磷酸）缓冲液     去除分子质量较小的杂质    透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内
（5）鸡红细胞具有细胞核，含有DNA，适合用于提取DNA；人红细胞无细胞核，且血红蛋白含量丰富，适合用于提取血红蛋白

点评 本题考查血红蛋白的提取和分离，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验采用的试剂及试剂的作用、实验步骤等，需要考生在平时的学习过程中注意积累．