【题目】人体内的t-PA蛋白能高效降解由血纤维蛋白凝聚而成的血栓,是心梗和脑血栓的急救药。
(1)为心梗患者注射大剂量的基因工程t-PA会诱发颅内出血。研究证实,将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸,能显著降低出血副作用。据此,先对天然的t-PA基因进行改造,再采取传统的基因工程方法表达该突变基因,可制造出性能优异的t-PA突变蛋白,该工程技术称为__________。
(2)若获得的t-PA突变基因如图所示,那么质粒pCLY11需用限制酶__________和__________切开,才能与t-PA突变基因高效连接。
(3)将连接好的DNA分子导入大肠杄菌中,对大肠杆菌接种培养。在培养基中除了加入水、碳源、氮源等营养物质外,还应加入__________进行选择培养,以筛选成功导入pCLY11的细菌。配置好的培养基通常采用__________法进行灭菌。
(4)对培养得到的菌落进行筛选,其中菌落为__________色的即为含t-PA突变基因重组DNA分子的大肠杆菌。得到的大肠杆菌能否分泌t-PA突变蛋白,可通过该细胞产物能否与__________特异性结合进行判定。
【答案】蛋白质工程 XmaI BglII 新霉素 高压蒸汽灭菌法 白 t-PA蛋白抗体
【解析】
本题考查基因工程和蛋白质工程的相关知识。基因工程的基本操作步骤:获取目的基因→构建基因表达载体→导入受体细胞→得到转基因生物→目的基因检测与鉴定。蛋白质工程可以通过基因修饰或基因合成,对现有的蛋白质进行改造,或制造新的蛋白质以满足人类的生产和生活的需求。
(1)对天然的t-PA基因进行改造,以制造出性能优异的t-PA突变蛋白的技术称为蛋白质工程;
(2)如图所示,由于目的基因的两端的碱基序列分别是CCGG、CTAG ,所以应用XmaI和BglII两种限制酶切割,以便于把目的基因连接到质粒pCLY11上;
(3)由图1可知,将连接好的DNA分子导入大肠杆菌中,含t-PA突变基因重组DNA分子的细胞具有新霉素抗性,在培养基中应加入新霉素进行选择培养,以筛选成功导入pCLY11的细菌。配置好的培养基通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌;
(4)由于限制酶切割质粒破坏了mlacZ基因,所以含t-PA突变基因重组DNA分子的细胞所长成的菌落呈白色。检查t-PA突变蛋白可用t-PA抗体,观察能否发生特异性结合进行判定。
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【题目】某科研小组以蚕豆根尖为材料,采用微核实验(检测细胞染色体或有丝分裂损伤的一种遗传毒性试验方法),对吲哚乙酸的遗传毒性进行了研究,遗传毒性可以用有丝分裂数指数(MI%)(MI%=分裂细胞数/观察细胞总数100%)表示。现用吲哚乙酸处理蚕豆6h、12h、24h,测定结果如图。下列相关叙述错误的是( )
A.吲哚乙酸是一种具有调节作用的蛋白质
B.吲哚乙酸对蚕豆根的遗传毒性具有两重性
C.在一定范围内,不同浓度处理24h时所造成的影响显著高于6h
D.细胞内染色体的存在状态可作为判断有丝分裂各时期的依据
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【题目】氨基丁酸作为哺乳动物中枢神经系统中广泛分布的神经递质,在控制疼痛方面的作用不容忽视.其作用机理如下图所示。请回答下列有关问题:
(1)氨基丁酸在突触前神经细胞内合成后,可能需要经_______才能与突触小体膜(突触前膜)融合并分泌出去。当兴奋抵达神经末梢时氨基丁酸释放,并与位于图中突触后膜上的____________结合后,通道开启,使氯离子内流,从而抑制突触后神经细胞 ____________(填“静息、电位”或“动作电位”)的产生。
(2)人体注射麻醉剂后,麻醉剂起到了与____ ( 填物质名称)一样的功能,从而可 ____________(填缩短或延长)氯离子通道打开的持续时间,产生麻醉效果。
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【题目】同位素示踪法能有效的追踪物质的运行和变化规律,该方法的使用,使人们更加深入的了解了叶绿体中发生的光合作用过程。回答下列问题:
(1)给小球藻提供C18O2和H2O,一段时间后,释放的氧气中含有18O。氧气中含有18O是由于____________。
(2)卡尔文利用同位素示踪法进行了如下实验,以14CO2作为小球藻光合作用的原料,通过不断缩短用煮沸的甲醇杀死小球藻的时间,再将提取物经过纸层析法进行____________,根据____________,推测出了C的转移过程。
反应时间 | 带14C标记的化合物 |
30s | 多种 |
5s | 14C3,14C5,14C6 |
<1s | 90%14C3 |
(3)在此实验之后,卡尔文通过类似的实验方法进一步找出了与CO2反应的物质,请根据暗反应中物质的变化规律,推测出卡尔文所用的实验方案__________(简要写出实验思路即可)。
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【题目】目前广泛应用的新型冠状病毒检测方法是实时荧光RT-PCR技术。RT—PCR是将RNA逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术,具体过程如图所示,下列说法不正确的是( )
A.引物A与引物B应该具有不同的碱基序列
B.过程Ⅱ通过控制温度的变化实现目标序列的循环扩增
C.该反应体系中应加入缓冲液、引物、四种核糖核苷酸、逆转录酶、Taq酶等物质
D.该检测方法的应用依赖于新型冠状病毒特异性序列的确定
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【题目】将不含IAA的琼脂块a和含有适宜浓度IAA的琼脂块aˊ分别放在去尖端的玉米胚芽鞘切段上。给予放置aˊ的胚芽鞘单侧光照射,发现胚芽鞘弯曲生长,结果如下图。下列叙述正确的是( )
A.该实验体现了IAA作用的两重性
B.dˊ上IAA量小于aˊ的原有的IAA量
C.aˊ的胚芽鞘弯曲生长体现植物向光性
D.胚芽鞘bˊ侧细胞能运输IAA而cˊ侧细胞不能
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【题目】下图是人体某组织内环境示意图。A、B、C是液体,1、2是不同的结构,3是组织细胞。以下叙述中正确的是
A. 花粉过敏会引起A增多
B. 2处细胞直接的内环境为B
C. 机体新陈代谢主要在C中进行
D. A中的O2进入3中被利用至少要通过5层生物膜
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【题目】研究发现,当果蝇的一条常染色体上的隐性基因t纯合时,雌蝇即转化为不育的雄蝇。现将基因t位点杂合的雌蝇与纯合隐性雄蝇作为亲本杂交,则理论上性别比例(♂∶♀)是( )
A.9∶7B.3∶1C.13∶3D.11∶5
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【题目】某生物小组的同学用如图所示的装置培养乳酸菌。请回答下列问题:
(1)实验室中可用番茄汁来培养微生物。将番茄汁过滤并进行______________处理,冷却后接种乳酸菌。番茄汁为乳酸菌提供的基本营养物质有____________________________。向培养基中加入的琼脂的作用是____________________________。
(2)密封玻璃罐前先将蜡烛点燃,原因是____________________________。
(3)研究小组筛选了2种可在pH=3.0条件下生长的乳酸菌菌株进行产酸能力研究,并提取发酵液研究了这2种乳酸菌对金黄色葡萄球菌的抑制作用,实验结果见下表:
编号 | pH | 酸度(0T) | 抑菌圈直径(mm) |
菌株DJ3 | 3.69 | 179.1 | 21.33 |
菌株DJ4 | 4.30 | 109.7 | 17.72 |
乳酸溶液 | 3.70 | 176.4 | 17.92 |
乳酸溶液 | 4.31 | 109.5 | 15.69 |
空白对照 | 6.60 | 15.4 | 8.64 |
产酸能力较强的菌株是______________,根据实验数据分析,乳酸菌发酵液的抑菌机制可能是____________________________。
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