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【题目】为探究NaCl和CuSO4对唾液淀粉酶活性的影响,某同学进行了实验,实验步骤和结果见表。请回答:

(1)实验中加入缓冲液的作用是____________________________________

(2)分析实验结果可知:对酶活性有影响的离子是______________,其中对酶活性有抑制作用的离子是______________,对酶活性有促进作用的离子是__________

(3)该实验中设置4号试管的目的是____________;设置3号试管的目的是____________

(4)上述实验中若用斐林试剂代替碘溶液进行检测,1~4号试管中的颜色依次是________________________________。根据上述实验结果,在操作过程中,保温之前不能加入斐林试剂,其原因是______________

【答案】维持反应液中pH的稳定 氯离子和铜离子 铜离子 氯离子 对照 确定钠离子和硫酸根离子对唾液淀粉酶催化活性是否有影响 深砖红色 无砖红色(蓝色) 浅砖红色 浅砖红色 斐林试剂中含有铜离子,可抑制唾液淀粉酶的活性

【解析】

分析实验结果:加入1% NaCl溶液的1号试管中,淀粉被淀粉酶水解了,可能是Na+Cl-对酶的活性有促进作用,如果Na+能够促进唾液淀粉酶的活性,则3号试管中最后的结果应该也是无色,而3号试管中实验结果为浅蓝色,可见其促进作用的不是Na+,而是Cl-;同理,通过2号和3号试管的比较可知,Cu2+能够抑制唾液淀粉酶的活性.

1PH是无关变量,要进行控制,表格中显示“pH6.8缓冲液”,就是保证各试管中PH相同且是唾液淀粉酶的适宜PH
2)比较实验结果,1号无色说明该试管淀粉已经完全分解,2号深蓝色说明该试管淀粉没被分解,34号浅蓝色说明该试管淀粉部分被分解;再比较各试管加的试剂,可知4号是对照,3号试管加的试剂对酶的活性没影响,则Cl-有促进作用;Cu2+有抑制作用.
33号试管加入的Na2SO4,与12号有重复的,其作用是确定Na+SO42-对唾液淀粉酶催化活性是否有影响.
41号试管中的唾液淀粉酶的活性增强,淀粉被水解成葡萄糖,所以加入斐林试剂后由深砖红色沉淀生成,2号试管中的唾液淀粉酶的活性受抑制,淀粉未被水解成葡萄糖,所以加入斐林试剂后无砖红色,3号试管中的唾液淀粉酶的活性为受到影响,淀粉部分被水解成葡萄糖,所以加入斐林试剂后由浅砖红色沉淀生成,4号试管中的唾液淀粉酶的活性也未受到影响,结果同3号试管;斐林试剂中含有Cu2+,对淀粉酶的活性又影响,故保温之前不能加入斐林试剂.

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(2)若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d。从隐性纯合子分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶SmaⅠ完全切割,产物中共有__________种不同DNA片段。为了提高实验成功率,需要通过__________技术扩增目的基因,以获得大量的目的基因。

(3)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是__________。在导入重组质粒后,为了筛选出含质粒的大肠杆菌,一般先用添加__________的培养基进行培养,然后将生长的菌接种到只含__________的培养基中培养,可进一步筛选出含重组质粒的受体细胞。

(4)假设用BamHⅠ切割DNA获取目的基因,用MboⅠ切割质粒,然后形成重组质粒,若将插入在抗生素B抗性基因处的目的基因重新切割下来,能否用BamHⅠ?__________。为什么?____________________

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