Question

对番茄的研究中发现，害虫损伤番茄叶片后，叶上的细胞壁能释放出一种类激素因子，这种物质能通过细胞组织扩散到茎和其他叶片上，启动蛋白酶抑制剂的基因后，开始高效合  成蛋白酶抑制剂，并在茎叶中迅速积累，以对付害虫的再次侵袭．蛋白酶抑制剂对害虫的消化酶有抑制作用，因此害虫取食后，就会因无法消化食物而被杀死．
人们尝试着将番茄的蛋白酶抑制剂基因导入玉米，让玉米获得与番茄相似的抗虫性状，以对付异常猖獗的玉米螟（一种玉米害虫）．试分析回答下列问题：
（1）若检测转入的蛋白酶抑制剂基因是否转入，应采用

 

法进行检测；若检测蛋白酶抑制剂基因是否表达，应采用

 

技术进行检测．
（2）将番茄的蛋白酶抑制基因转入玉米细胞时，最常采用的方法是

 

，除此之外还有

 

和

 

等．
（3）重组DNA的建构需要的工具酶有

 

．
（4）在构建基因表达载体时，除了要在重组DNA中插入目的基因外，还需要有启动子、终止子以及

 

．
（5）若要培养无病毒玉米植株，可取玉米的

 

进行快速繁殖．在培养的培养基中除了要加入所需的营养物质外，还要加入

 

和

 

两种激素．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体．
基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因．
目的基因分子水平上的检测：
①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术
②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术
③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术

解答： 解：（1）若检测转入的蛋白酶抑制剂基因是否转入，应采用DNA分子杂交法进行检测；若检测蛋白酶抑制剂基因是否表达，应采用抗原--抗体杂交技术进行检测．
（2）将番茄的蛋白酶抑制基因转入玉米细胞时，最常采用的方法是农杆菌转化法，除此之外还有基因枪法和花粉管通道法等．
（3）重组DNA的建构需要同种限制酶切割目的基因和运载体，然后运用DNA连接酶连接目的基因和质粒形成重组质粒．
（4）在构建基因表达载体时，除了要在重组DNA中插入目的基因外，还需要有启动子、终止子以及标记基因．
（5）一般植物的茎尖和根尖分生组织不含病毒，因此若要培养无病毒玉米植株，可取玉米的茎尖（或分生组织）进行快速繁殖．在培养的培养基中除了要加入所需的营养物质外，还要加入生长素和细胞分裂素两种激素．
故答案为：
（1）DNA分子杂交抗原--抗体杂交
（2）农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法
（3）限制性内切酶和DNA连接酶 
（4）标记基因
（5）茎尖（或分生组织）    生长素    细胞分裂素

点评：本题考查了基因工程的相关知识，要求考生能够基因工程目的基因检测与鉴定的方法；识记目的基因导入植物细胞的方法；识记基因表达载体的构成；识记培育无病毒植物的实验材料和培养基成分等知识，难度不大，属于考纲中识记层次的考查．