Question

【题目】我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻，改良了稻米的营养品质．如图为培育转基因水稻过程示意图，请分析回答．
（1）为了在短时间内获得大量铁结合蛋白基因，可以采用技术．与细胞内DNA复制时的解旋过程相比，该技术的DNA解链过程有何不同？（写出一点即可）
（2）构建重组Ti质粒时，通常先要用分别切割含目的基因的DNA片段和质粒，以使目的基因能插入农杆菌Ti质粒的中．将重组Ti质粒导入农杆菌时，可以用处理农杆菌，使重组Ti质粒易于导入．然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的上．
（3）将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得；检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因稻米 ．

Answer 1

【答案】
（1）PCR；不需要解旋酶
（2）（同种）限制酶； T﹣DNA； Ca2+（氯化钙）；染色体DNA
（3）含有重组质粒的愈伤组织；铁的含量
【解析】解：（1）PCR技术可在体外大量扩增目的基因，因此为了在短时间内获得大量铁结合蛋白基因，可以采用PCR技术．与细胞内DNA复制时的解旋过程相比，该技术的DNA解链过程不需要解旋酶，通过高温变性达到解旋的目的．（2）农杆菌中的Ti质粒上的T﹣DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上．根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T﹣DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上．构建重组Ti质粒的过程中，通常要用同一种限制酶分别切割Ti质粒和含目的基因的DNA片段，使以使目的基因能插入农杆菌Ti质粒的T﹣DNA中．将目的基因导入微生物细胞时常用用感受态转化法，即用CaCl2溶液处理农杆菌使之成为感受态细胞，易于重组Ti质粒导入．然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的染色体DNA上．（3）将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得含有重组质粒的愈伤组织．该基因工程的目的基因为铁结合蛋白基因，因此检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因水稻种子中铁含量．

所以答案是：（1）PCR 不需要解旋酶（2）（同种）限制酶　 T﹣DNA　 Ca2+（氯化钙）　 染色体DNA（3）含有重组质粒的愈伤组织　　铁的含量

【考点精析】通过灵活运用基因工程的原理及技术，掌握基因工程的原理是利用DNA重组技术即可以解答此题．