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    6．柯斯质粒是一种人工建构含有λ噬菌体DNA的cos位点（指互补的黏性末端结合形成的双链DNA区域）和质粒复制子（ori）的新型载体，它同时兼具两者特性，长度一般为5-7kb．λ噬菌体的末端酶能识别并切割两端由cos位点包围着的噬菌体基因组长度（38-52kb）的DNA片段，凡具有cos位点的任何DNA分子只要在长度上相当于噬菌体的基因组，就可以被识别并包装成类似噬菌体感染大肠杆菌．图1为应用柯斯质粒进行某一真核基因克隆的方案图，图2为不同的限制酶及相应的切割位点．请据图分析回答：

    （1）柯斯质粒可以作为基因工程载体的理由是具备标记基因、多种限制酶切割位点和启动子、终止子等．
    （2）如图1所示柯斯克隆方案，宜采用Sau3A、HindIII酶对真核基因进行酶切，采用BamHI、HindIII酶对柯斯质粒进行酶切，经连接后图中b（填a或b）将会被重新包装进入λ噬菌体；柯斯质粒作为载体可携带的真核基因长度范围为31-47kb．
    （3）检测是否成功实现转化的实验思路是：将新包装的类似噬菌体去感染大肠杆菌，后者能够在含氨苄青霉素的培养基上生长即为转化成功．
    （4）从图中信息可知上述柯斯克隆方案存在的缺点是经限制酶切割作用产生的柯斯质粒载体、真核基因自身也会连接形成多聚体分子．

    分析 分析题图：不宜用限制酶PstI切割，因为该酶切割会破坏标记基因（氨苄青霉素抗性基因）；不宜用限制酶EcoRI切割，因为该酶切割会破坏目的基因；由于限制酶BamHI的识别序列中含有限制酶Sau3A的识别序列，因此为了防止目的基因与运载体反向连接，宜采用 Sau3A、Hind III酶对真核基因进行酶切，采用BamHI、Hind III 酶对柯斯质粒进行酶切．

    解答 解：（1）由图可知，柯斯质粒可以作为基因工程载体的理由是具备标记基因（氨苄青霉素抗性基因）、多种限制酶切割位点（具有限制酶EcoRI、PstI、BamHI、Hind III 的切割稳定）和启动子、终止子等．
    （2）不宜用限制酶PstI切割，因为该酶切割会破坏标记基因（氨苄青霉素抗性基因）；不宜用限制酶EcoRI切割，因为该酶切割会破坏目的基因；由于限制酶BamHI的识别序列中含有限制酶Sau3A的识别序列，因此为了防止目的基因与运载体反向连接，宜采用 Sau3A、Hind III酶对真核基因进行酶切，采用BamHI、Hind III 酶对柯斯质粒进行酶切；由于a只有一端有cos位点，而b的两端都有cos位点，因此经连接后图中b将会被重新包装进入λ噬菌体；柯斯质粒长度一般为5-7kb，λ噬菌体基因组长度为（38-52kb），凡具有cos位点的任何DNA分子只要在长度上相当于噬菌体的基因组，就可以被识别并包装成类似噬菌体感染大肠杆菌，因此柯斯质粒作为载体可携带的真核基因长度范围为（38-7）～（52-5），即31-47kb．
    （3）由图可知，标记基因是氨苄青霉素抗性基因，因此检测是否成功实现转化的实验思路是：将新包装的类似噬菌体去感染大肠杆菌，后者能够在含氨苄青霉素的培养基上生长即为转化成功．
    （4）从图中信息可知上述柯斯克隆方案存在的缺点是经限制酶切割作用产生的柯斯质粒载体、真核基因自身也会连接形成多聚体分子．
    故答案为：
    （1）标记基因  多种限制酶切割位点
    （2）Sau3A、Hind III      BamHI、Hind III     b      31-47kb 
    （3）氨苄青霉素
    （4）经限制酶切割作用产生的柯斯质粒载体、真核基因自身也会连接形成多聚体分子

    点评 本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、操作工具及操作步骤，能结合图中信息准确判断切割目的基因和运载体所需的限制酶，同时能结合题中信息准确答题，有一定难度，属于考纲理解和应用层次的考查．

    练习册系列答案
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    16．母亲生育年龄与所生子女先天愚型患病率的关系如图所示．由图可知，要降低后代中先天愚型病的发病率，主要的优生措施是（　　）
    A．婚前检查B．适龄生育C．遗传咨询D．产前诊断

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    17．下列关于生物科学研究方法运用的叙述中，错误的是（　　）
    A．沃森和克里克用模型建构的方法发现了DNA的双螺旋结构
    B．摩尔根用类比推理的方法证明基因位于染色体上
    C．鲁宾和卡门用同位素标记法发现光合作用释放的氧气来自于水
    D．孟德尔用假说演绎法得出了基因的分离和自由组合定律

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    14．下列有关“微生物的分离与培养”实验的叙述中，正确的是（　　）
    A．利用平板划线法可对微生物进行接种、纯化、分离和计数
    B．对培养皿进行编号或对菌种进行标注时，应使用记号笔在皿底标记
    C．倒平板时，应将打开的培养皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上
    D．将好氧型菌株接种到培养液中需静置培养，防止培养液沾染试管壁引发污染

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    1．蝴蝶兰是一种观赏植物，因其美观、耐寒、易于栽培而备受青睐．某科研团队为研究蝴蝶兰的耐旱机理，测得该植株正常和干旱条件下CO2吸收速率日变化曲线如图1；图3为蝴蝶兰在干旱时CO2固定模式（即CAM途径，景天科酸代谢）．请据图回答：

    （1）由图1可知，正常条件下P点时刻蝴蝶兰植株的光合作用速率等于（选填“大于”、“等于”或“小于”）呼吸作用速率；图2中的A为图1中Q点时刻叶肉细胞中的CO2气体扩散示意图，请参照此图在图2中的B中表示出P点时刻蝴蝶兰叶肉细胞CO2气体流动的示意图．
    （2）比较图1中的两条曲线，干旱条件下蝴蝶兰吸收CO2的特点是夜间吸收CO2，白天几乎不吸收．
    （3）根据图3可知，蝴蝶兰夜间吸收的CO2以化合物苹果酸的形式储存；白天释放CO2，通过光反应提供的ATP、[H]完成卡尔文循环（暗反应）．
    （4）栽培蝴蝶兰欲使其较快生长，应避免长期干旱，原因是干旱条件下蝴蝶兰夜间会出现将淀粉转化为甘油酸．

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    科目：高中生物 来源：2015-2016广东汕头金山中学高二下学期期中考试生物试卷（解析版） 题型：综合题

    下图是利用单克隆抗体技术制备三聚氰胺特异性抗体的过程，请据图回答：

    （1）单克隆抗体的制备过程中要用到_______________和_______________技术。

    （2）由于三聚氰胺分子量过小，不足以激活高等动物的免疫系统，因此在制备抗体前必须对其进行①过程，下列物质中哪一种不适合作“扩容”抗原分子的是（ ）

    A．蛋白质 B．多糖 C．磷脂 D．核苷酸

    （3）②过程会使小鼠产生能分泌相应________的B淋巴细胞，此过程属于特异性免疫中的________免疫。

    （4）单克隆抗体的制备所基于的免疫学基本原理是_____________________________________

    _______________________。

    （5）③过程动物细胞特有的促融方法是用______________，④过程用特定的选择性培养基筛选，会使________________________________________的细胞死亡；选出的杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，才能获得产三聚氰胺抗体的杂交瘤细胞株。

    （6）制备的三聚氰胺单克隆抗体可用于检测乳制品中存在的微量三聚氰胺，说明三聚氰胺单克隆抗体具有____________等特点。

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    科目：高中生物 来源：2015-2016广东汕头金山中学高二下学期期中考试生物试卷（解析版） 题型：选择题

    蛋白质工程的基本流程正确的是

    ①蛋白质分子结构设计；②DNA合成；③预期蛋白质功能；④据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列

    A．①→②→③→④ B．④→②→①→③

    C．③→①→④→② D．③→④→①→②

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    科目：高中生物 来源：2015-2016甘肃天水第一中学高二下第一次月考生物试卷（解析版） 题型：综合题

    某岛屿居民与该岛上的植物、兔、鼠、釉和鹰构成的食物网如下图。某个时期，当地居民大量捕杀釉，导致岛上鼠种群爆发，随后由鼠疫杆菌引起的鼠疫通过跳蚤使人感染。回答问题：

    （1）该食物网中，植物中的能量能通过________条食物链传递给鹰；鹰所处的营养级是________；兔和人的种间关系是________；鼠疫杆菌与人的种间关系式________。

    （2）通常情况下，鼬对鼠种群数量的影响________（大于，小于、等于）寄生在鼠身上的跳蚤对鼠种群数量的影响；大量不杀鼬会导致鼠种内竞争________（增强、不变、减弱）。

    （3）生长在该岛上的蘑菇属于生态系统的________（生产者、消费者、分解者），其体内储存的能量________（能、不能）传递给植物。

    （4）若往该岛屿引入一种新的物种，该物种能较好的适应岛屿的环境条件，则短时间内，该物种的种群数量呈________曲线增长，最终由于空间、资源等因素的限制，该物种的数量将达到 ________，并一段时间内数量基本保持不变。

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    17．某农田弃耕后发生了一系列的演替，演替过程中不同阶段优势植物和常见植物记录如表．相关判断错误的是（　　）
    弃耕年数优势植物其他常见植物
    0～1马唐草
    1飞篷草豚草
    2紫菀豚草
    3须芒草
    5～10灌木丛火炬松
    50～150栎等硬木树山核桃
    A．在演替过程中不断产生新物种，并取代原有的物种
    B．随着时间的推移，群落的垂直结构变得复杂
    C．农田弃耕5～10年后，群落演替至少发展到了灌木阶段
    D．与草本植物阶段相比，木本植物阶段的演替比较缓慢

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