Question

【题目】黄曲霉毒素B1（AFB1）存在于被黄曲霉菌污染的饲料中，它可以通过食物链进入动物体内并蓄积，引起瘤变。某些微生物能合成AFB1解毒酶。

将该酶添加在饲料中可以降解AFB1，清除其毒性。下图为采用基因工程技术生产AFB1解毒酶的流程图。

请回答：

（1）基因工程中将目的基因导入酵母细胞，最常用的化学方法是_____________。

（2）酵母细胞导入AFB1解毒酶基因后，采用_____________技术，检测到AFB1解毒酶基因存在酵母细胞内。实验发现酵母菌中没有检测到合成的AFB1解毒酶，分析原因可能是_____________。

（3）采用蛋白质工程进一步改造该酶的基本途径是：从提高酶的活性出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的_________________________。

（4）生态工程需遵循其基本原理，系统整体性原理强调各组分之间要有_____________，只有这样地才能顺利完成能量、物质、信息等的转换和流通，并且实现__________________________。

Answer 1

【答案】CaCl2处理 DNA分子杂交技术 酵母细胞中AFB1解毒酶基因没有表达（或没有转录和翻译） 脱氧核苷酸序列 适当的比例 总体功能大于部分之和的效果（或“1+1＞2”）

【解析】

分析题图：图示表示采用基因工程技术生产AFB1解毒酶的流程，Ⅰ表示提取总RNA的过程，并以此为模板逆转录为cDNA；Ⅱ表示采用PCR技术体外扩增目的基因的过程。

（1）基因工程中，将目的基因导入酵母细胞等微生物细胞常常需要先用CaCl2处理，使得酵母细胞成为感受态，便于目的基因导入。

（2）检测AFB1解毒酶基因应该采用DNA分子杂交技术；若没有检测到AFB1解毒酶，可能是因为酵母细胞中AFB1解毒酶基因没有表达（或没有转录和翻译）。

（3）蛋白质工程的过程：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列。

（4）生态工程的系统整体性原理强调各组分之间要有适当的比例，只有这样地才能顺利完成能量、物质、信息等的转换和流通，并且实现总体功能大于部分之和的效果。