[题目][生物--选修1:生物技术实践]某兴趣小组采用稀释涂布平板法对牛奶样品中的微生物进行计数.步骤如下.回答下列问题:(1)梯度稀释:每次取样前需用手指轻压移液管上的橡皮头.吹吸三次.目的是 .(2)涂布平板:取O.lmL稀释液.选用下图中的均匀地涂布在牛肉膏蛋白腺固体培养基表面.每个浓度下涂布三个平板.为避免杂菌污染.接种应在附近进行.可� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

【题目】【生物——选修1:生物技术实践】某兴趣小组采用稀释涂布平板法对牛奶样品中的微生物进行计数，步骤如下。回答下列问题:

（1）梯度稀释：每次取样前需用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，目的是____________。

（2）涂布平板：取O.lmL稀释液，选用下图中的____________均匀地涂布在牛肉膏蛋白腺固体培养基表面，每个浓度下涂布三个平板。为避免杂菌污染，接种应在_____________________附近进行。可用____________的培养基作为空白对照以检验培养基配制是否达标。

（3）培养与计数：将上述平板放入恒温培养箱中培养，每隔12小时统计一次菌落数，取菌落数稳定时的记录作为结果，防止______________。在104、105、106倍稀释时的统计结果记录如下表：

计算得每毫升牛奶样品中细菌数大约是___________个。这种方法统计的活菌数往往比实际数目低，原因是___________。除此以外，___________也是测定微生物数量的常用方法，此方法需要使用血细胞计数板。

【答案】使微生物和无菌水混合均匀 B （酒精灯）火焰未接种因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目 5×l07 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落显微镜直接计数

【解析】试题分析：本题考查微生物的计数的有关知识，意在考查考生对知识的识记、理解和运用能力。

（1）每次取样前需用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，目的是使微生物和无菌水混合均匀。

（2）稀释涂布平板法在涂布平板是需要用到涂布器。图中B是涂布器，所以用C滴管取O.lmL稀释液后，需要选择B涂布器均匀地涂布在牛肉膏蛋白腺固体培养基表面。为避免杂菌污染，接种应在（酒精灯）火焰附近进行。为检验培养基配制是否达标要用未接种的培养基作为空白对照。

（3）统计菌落数量时，应取菌落数稳定时的记录作为结果，防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。一般选择菌落数在30-300的平板进行计数，因此要选择稀释倍数为倍且培养时间为48h的统计结果进行计数，每毫升牛奶样品中细菌数大约是×=5×个。这种方法统计的活菌数往往比实际数目低，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。除此以外，显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法，此方法需要使用血细胞计数板。

项目	条件	结果	常用方法	应用范围
消毒	较为温和的物理或化学方法	仅杀死物体表面或内部的部分对人体有害的微生物	煮沸消毒法	日常用品
			巴氏消毒法	不耐高温的液体
			化学药剂消毒法	用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源
灭菌	强烈的理化因素	杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子	灼烧灭菌法	接种工具
			干热灭菌法	玻璃器皿、金属工具
			高压蒸汽灭菌法	培养基及容器的灭菌

练习册系列答案

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