Question

14．纤维素是自然界分布最广、含量最多的一种多糖，马、牛等食草动物具有消化纤维素的能力，请回答有关问题．
（1）与培养土壤中分离的纤维素分解菌相比，培养马胃中分离出的纤维素分解菌要调整培养基的pH，还要保证无氧（或无氧和温度等合理条件也可） 条件．配制好的培养基培养前应采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌处理．从功能上看，该培养基是选择 培养基．
（2）给锥形瓶内的培养液接种时应在酒精灯火焰附近进行，防止杂菌污染培养基．对无菌操作时用到的玻璃器皿要用干热灭菌 的方法彻底灭菌．
（3）某同学使用划线法分离纯化菌株，经一段时间培养，发现有的线上长满了菌，有的线上无菌落，造成这种情况的原因可能是划线操作时接种环灼烧后未冷却（或未从上一线末端开始划线）．
（4）将筛选培养的纤维素分解菌破碎后，用（密度梯度）离心的方法可将纤维素酶溶液与其他细胞成分分离开．纤维素酶能催化纤维素分解为还原性的葡萄糖，根据这一特性，可用斐林 试剂判断提取物是否起到了降解纤维素的作用．

Answer 1

分析 富含纤维素的环境中含有较多的纤维素分解菌，纤维素分解菌可以用刚果红染液产生的透明圈进行鉴别．筛选纤维素分解菌需要使用以纤维素为唯一碳源的选择培养基．纤维素酶能催化纤维素最终分解为葡萄糖，可以用斐林试剂检测葡萄糖．

解答 解：（1）马胃中的环境是相对缺氧的环境，培养马胃中分离出的纤维素分解菌要调整培养基的pH，还要保证无氧条件．培养基通常需要进行高压蒸汽灭菌法灭菌．从功能上看，该培养基含的纤维素是唯一的碳源，属于选择培养基．
（2）酒精灯火焰的外焰上方区域是高温无菌区，给锥形瓶内的培养液接种时应在酒精灯火焰附近进行，可以防止杂菌污染．无菌操作时用到的玻璃器皿要用干热灭菌发进行灭菌．
（3）平板划线法接种培养后，发现有的线上长满了菌，有的线上无菌落，可能的原因是接种环灼烧后未冷却烫死了菌种，（或未从上一线末端开始划线导致长满了菌）．
（4）可以用密度梯度离心法将纤维素酶溶液与其他细胞成分分离开．纤维素酶能催化纤维素分解为还原性的葡萄糖，可以用斐林试剂检测葡萄糖以判断提取物是否起到了降解纤维素的作用．
故答案为：
（1）无氧（或无氧和温度等合理条件也可）    高压蒸汽灭菌   选择
（2）杂菌    干热灭菌
（3）接种环灼烧后未冷却（或未从上一线末端开始划线）
（4）（密度梯度）离心     斐林

点评 本题主要考查纤维素分解菌的筛选与分离即培养的相关知识，意在强化学生相关知识点的分析和理解能力．