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    18.关于基因工程过程所使用的工具，下列叙述正确的是

    A.限制酶的作用是识别并切割外DNA片段中的任意序列

    B.DNA连接酶只能连接双链DNA片段互补的黏性末端

    C.利用质粒在宿主细胞内对目的基因进行大量扩增的过程可以称为克隆

    D.含有目的基因的重组DNA分子成功导入受体细胞后，会使受体细胞发生基因突变

    C

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    科目：高中生物 来源：2011-2012学年湖北武汉五校高二下学期期中统考生物试卷（带解析） 题型：综合题

    （14分）以下是关于生物工程技术的应用实例。据题回答：
    Ⅰ．1997年，科学家将动物体内的能够合成胰岛素的基因与大肠杆菌的DNA分子重组，并且在大肠杆菌中表达成功。为使基因表达载体能顺利进入大肠杆菌，一般需将大肠杆菌用____________处理，以增大其细胞壁的___________。基因表达载体随大肠杆菌的繁殖而进行增殖，其中的胰岛素基因在大肠杆菌内表达的标志是__________________（2分）。
    Ⅱ．利用基因工程，可以使哺乳动物的乳腺成为一种“生物反应器”，生产大量药用蛋白。这种动物基因工程操作的一般过程是：
    （1）首先，将______________与______________等调控组件重组在一起；
    （2）然后，通过_____________的方法，导入哺乳动物的受精卵中；
    （3）再次，将受精卵送入母体内，使其生长发育为转基因动物。从中选择_______性个体，待其进入泌乳期后，可以在其分泌的_______中来提取所需要的药用蛋白。
    Ⅲ．继哺乳动物乳腺发生器研发成功后，膀胱生物发生器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培养出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。
    （1）通常要将外源基因转入____  中，原因是____  （2分）；
    （2）通常采用____  技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组；
    （3）在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的____ 细胞中特异表达。

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    科目：高中生物 来源：2012-2013学年上海市浦东新区高三综合练习生物试卷 题型：综合题

    回答关于基因工程的问题

    口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种偶蹄动物传染病，目前常用接种弱毒疫苗的方法预防。疫苗的主要成分是该病毒的一种结构蛋白VP1。科学家尝试利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗，过程如下图所示

    （1）口蹄疫病毒的VP1蛋白进入动物体内，能引起机体产生特异性免疫反应。VP1蛋白在免疫反应中称为            。

    （2）口蹄疫病毒的遗传物质为RNA，要获得VP1基因可用               的方法合成DNA，再用限制性核酸内切酶将VP1基因片段切下。

    （3）如下图所示，若用2种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从合成的DNA上切下VPI目的基因，并将之取代质粒pZHZ1（3.7kb，1kb=1000对碱基）上相应的E—F区域 （0.2kb），那么所形成的重组质粒pZHZ2___________。

    A．既能被E也能被F切开               B．能被E但不能被F切开

    C．既不能被E也不能被F切开           D．能被F但不能被E切开

    （4）已知在质粒pZHZl中，限制酶G切割位点距限制酶E切割位点0．8kb，限制酶H切割位点距限制酶F切割位点O．5kb。若分别用限制酶G和H酶切两份重组质粒pZHZ2样品，据下表所列酶切结果判断VPI目的基因的大小为        kb；并将目的基因内部的限制酶G和H切割位点标注在下图中。

    （5）上述目的基因模板链中的TGA序列对应1个密码子，翻译时识别该密码子的tRNA上相应的碱基序列是            。

    （6）过程⑥的培养基中除了加入各种必需营养物质和                   等激素外，还需要添加   筛选出含有重组质粒的叶片小段。

    （7）获得表达VP1蛋白的番茄植株以后，需要进行免疫效力的测定。具体方法是：将转基因番茄叶片提取液注射到豚鼠体内，每半个月注射1次，3次后检测豚鼠血液内产生的             的数量。为了使结果可信，应设2组对照，分别注射          和          。

     

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    科目：高中生物 来源：河北省2009—2010学年度第二学期期中考试高二生物试卷 题型：综合题

    回答下列关于基因工程的问题：

    如图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”示意图，所用载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，质粒A导入细菌B后，其上的基因能得到表达，根据图示所给信息回答下列问题：

    (1)将目的基因和质粒结合形成重组质粒时，用同一种限制性内切酶分别切割目的基因和质粒，露出相同的黏性末端，将切下的目的基因片段插入质粒的切口处再加入适量的             ，使质粒与目的基因结合成重组质粒。

    (2)目前把重组质粒导入细菌细胞时，效率还不高；导入完成后得到的细菌，实际上有的根本没有导入质粒；有的导入的是普通质粒A；只有少数导入的是重组质粒。此处可以通过如下步骤来鉴别得到的细菌是否导入了质粒A或重组质粒：

    将得到的细菌涂抹在一个含有                的培养基上，能够生长的就是导入质粒A或重组质粒的，反之则没有。此过程中体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件                      ；                                            。

    (3)若进一步鉴定证明细菌中导入的是普通质粒A还是重组质粒，将得到的细菌涂抹在一个含有

                    的培养基上培养，若细菌                ，则导入的是普通质粒。如果利用DNA分子杂交原理来证明此过程，应该用                                    作为探针。

    （4）使体外重组的DNA分子转移到受体细胞内，主要是借鉴                        的途径。

    (5) 目的基因表达成功后，“工程菌”明显不同于细菌D。从变异的来源看，此变异属于         

           。导入细菌B细胞中的目的基因成功表达的标志是什么?                    。

     

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    18. 关于基因工程过程所使用的工具，下列叙述正确的是

    A.限制酶的作用是识别并切割外DNA片段中的任意序列

    B.DNA连接酶只能连接双链DNA片段互补的黏性末端

    C.利用质粒在宿主细胞内对目的基因进行大量扩增的过程可以称为克隆

    D.含有目的基因的重组DNA分子成功导入受体细胞后，会使受体细胞发生基因突变

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