为了从动物组织中提取纯净的DNA.首先要快速.有效地消化裂解动物组织细胞.消化裂解动物组织常用的方法有蛋白酶水解.表面活性剂处理.变性剂处理等.某科研人员拟使用加酶洗衣粉消化裂解猪肌肉样本.并提取猪的DNA.实验步骤如下:①取500mg剪碎的猪肌肉组织于离心管中.加40mg加酶洗衣粉和1.5mL超纯水混合.在一定温度条件下水浴消化24h.� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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为了从动物组织中提取纯净的DNA，首先要快速、有效地消化裂解动物组织细胞。消化裂解动物组织常用的方法有蛋白酶（如蛋白酶K）水解、表面活性剂处理、变性剂处理等。某科研人员拟使用加酶洗衣粉消化裂解猪肌肉样本，并提取猪的DNA。实验步骤如下：
①取500mg剪碎的猪肌肉组织于离心管中，加40mg加酶洗衣粉和1.5mL超纯水混合，在一定温度条件下水浴消化24h。
②加入苯酚、氯仿、异丙醇(25:24:1)混合液抽提。
③加0.2mg/mL的RNA水解酶于37。C水浴th。
④加醋酸钠和无水乙醇，4cc高速离心15min。
⑤用70qo乙醇洗涤沉淀两次，风干，得到高纯度的DNA。
请回答有关问题：
（1）加酶洗衣粉可以消化裂解动物组织细胞的原理是                        。
（2）步骤②的目的是                。步骤③的目的是              。
（3）步骤④中使用无水乙醇的目的是                              ，高速离心时温度保持在4℃的原因有                             、                    等。
（4）如果要将加酶洗衣粉法提取DNA与蛋白酶K法提取DNA的效果进行对比，请简要说明实验设计思路。                                               。
（5）若是从血细胞中提取DNA，则选择       （选填“鸡血”或“哺乳动物红细胞”）。破碎细胞时，向血细胞液中加入一定量的         ，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。

（1）洗衣粉中蛋白酶和表面活性剂等可以破坏细胞膜
（2）使蛋白质变性，抽提蛋白质   水解RNA
（3）析出DNA，提取含杂质较少的DNA   降低核酸水解酶的活性，防止DNA降解
降低分子运动，易于形成沉淀析出（增加DNA分子的柔韧性，减少断裂）
（4）将上述实验步骤中的加酶洗衣粉换成蛋白酶K，其他实验步骤相同，得到DNA后，测定DNA的量、纯度
（5）鸡血   蒸馏水

解析试题分析：
（1）细胞膜被破坏可导致细胞裂解，由于细胞膜中含有蛋白质，所以蛋白酶可以促进细胞裂解，另外，表面活性剂也可以破坏细胞膜。
（2）苯酚、氯仿、异丙醇混合液可以促进蛋白质变性，便于抽提；RNA水解酶可以水解RNA。
（3）DNA在无水乙醇中的溶解度很低，利用无水乙醇可以析出纯度更高的DNA；高速离心时要保持低温，原因是：可以降低水解酶的活性，防止DNA被水解；还可以降低分子运动，易于形成沉淀析出。
（4）实验目的是研究蛋白酶K提取DNA的效果，因此应将上述实验中的加酶洗衣粉换成蛋白酶K，其他实验步骤相同，得到DNA后，测定DNA的量、纯度。
（5）因为哺乳动物的成熟的红细胞无细胞核，不能提取出DNA分子，因此应选用鸡血；破碎细胞时，可以加入一定量的蒸馏水，细胞会吸水涨破，内容物流出。
考点：本题考查DNA的提取的有关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力；具备验证简单生物学事实的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理。

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