Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：
（1）步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的 。
（2）步骤②中，重组胚胎培养到 期时， 可从其内细胞团分离出ES细胞。
（3）步骤③中，需要构建含有Rag2基因的表达载体。可以根据Rag2基因的 设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有 酶的酶切位点。
（4）为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的 ，用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。
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人体内环境稳态的维持主要依赖神经—体液—免疫调节机制。下图表示人体稳态调节过程中细胞间信号传递的三种方式，其中A～F为细胞．请回答下列问题：
（1）上图中特定细胞分泌的信息物质包括______________、抗体和淋巴因子等，经体液运输到达靶细胞。B、D、F细胞能分别接受不同信息，是因为它们具有不同的_____________.
（2）当人受到寒冷刺激时，下丘脑细胞分泌_______激素，通过图中________方式传递到垂体细胞进而影响甲状腺激素的分泌。
（3）刺激C细胞，受刺激部位的膜内电位变化是______________________。
（4）当结核杆菌侵入人体后，特异性免疫过程中的信号传递以图中___________方式进行。丙图中， 若F是肿瘤细胞，则E是_________________________。
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利用种皮白色水稻甲（核型2n）进行原生质体培养获得再生植株，通过再生植株连续自交，分离得到种皮黑色性状稳定的后代乙（核型2n）。甲与乙杂交得到丙，丙全部为种皮浅色（黑色变浅）。设种皮颜色由1对基因A和a控制，且基因a控制种皮黑色。请回答：
（1）甲的基因型是_________。上述显性现象的表现形式是__________。
（2）请用遗传图解表示丙为亲本自交得到子一代的过程。
（3）在原生质体培养的过程中，首先对种子胚进行脱分化得到愈伤组织，通过________培养获得分散均一的细胞。然后利用没处理细胞获得原生质体，原生质体再生出________，才能进行细胞分裂，进而分化形成植株。
（4）将乙与缺少1条第7号染色体的水稻植株（核型2n-1，种皮白色）杂交获得子一代，若子一代的表现型及其比例为_______，则可将种皮黑色基因定位于第7号染色体上。
（5）通过建立乙植株的_________，从中获取种皮黑色基因，并转入玉米等作物，可得到转基因作物。因此，转基因技术可解决传统杂交育种中_______亲本难以有性杂交的缺陷。
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果蝇的灰体（E）对黑檀体（e）为显性；短刚毛和长刚毛是一对相对性状，由一对等位基因（B，b）控制。这两对基因位于常染色体上且独立遗传。用甲、乙、丙三只果蝇进行杂交实验，杂交组合、F1表现型及比例如下：
（1）根据实验一和实验二的杂交结果，推断乙果蝇的基因型可能为_______或________。若实验一的杂交结果能验证两对基因E，e和B，b的遗传遵循自由组合定律，则丙果蝇的基因型应为_______________。
（2）实验二的F1中与亲本果蝇基因型不同的个体所占的比例为________。
（3）在没有迁入迁出、突变和选择等条件下，一个由纯合果蝇组成的大种群个体间自由交配得到F1 ，F1中灰体果蝇8400只，黑檀体果蝇1600只。F1中e的基因频率为_______________，Ee的基因型频率为________。亲代群体中灰体果蝇的百分比为________。
（4）灰体纯合果蝇与黑檀体果蝇杂交，在后代群体中出现了一只黑檀体果蝇。出现该黑檀体果蝇的原因可能是亲本果蝇在产生配子过程中发生了基因突变或染色体片段缺失。现有基因型为EE，Ee和ee的果蝇可供选择，请完成下列实验步骤及结果预测，以探究其原因。（注：一对同源染色体都缺失相同片段时胚胎致死；各型配子活力相同）实验步骤：
①用该黑檀体果蝇与基因型为_______________的果蝇杂交，获得F1 ；
②F1自由交配，观察、统计F2表现型及比例。
结果预测：I．如果F2表现型及比例为__________________，则为基因突变；
II．如果F2表现型及比例为_________________，则为染色体片段缺失。
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Kisspeptin，简称Kp，是Kp神经元产生的一类多肽类激素，它通过调节生物体内雌激素含量来调控生殖活动。
Ⅰ．通常情况下，下图中的过程①参与鹌鹑体内雌激素含量的调节；排卵前期，启动过程②进行调节。据图回答。
⑴神经元内合成Kp的细胞器是 ；Kp作用的靶细胞是 。器官A是 。
⑵在幼年期，通过过程①反馈调节，Kp释放量 ，最终维持较低的雌激素含量；排卵前期，启动过程②的生理意义是 ，促进排卵。
Ⅱ．Kp—10是Kp的一种。为研究Kp—10对鹌鹑产蛋的影响，对生长至20日龄的鹌鹑连续20天腹腔注射一定剂量的Kp—10，从产蛋之日起统计每日的产蛋率，结果见下图。
⑶据图可知，Kp—10 （影响/不影响）鹌鹑开始产蛋的日龄，在50日龄内，Kp—10影响产蛋率的趋势是 。
Ⅲ．综合分析
⑷综合Ⅰ、Ⅱ分析，推测Kp—10调控鹌鹑产蛋的方式属于 调节。
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研究者将空腹的大鼠置于冷水中，探究冷水刺激对大鼠生理功能的影响。
（1）冷水刺激引起实验大鼠皮肤___________产生兴奋，兴奋沿传入神经到达神经中枢，经神经中枢处理，使传出神经末梢释放_______________，引起皮肤血管________，减少皮肤散热量；同时引起_______（填激素名称）分泌增加，细胞代谢加快，产热量增加，以维持体温稳定。
（2）冷水刺激产生的兴奋还可以通过神经中枢作用于胰岛，引起__________分泌增加，该激素促进___________分解，血糖水平升高，以对抗冷水刺激。
（3）冷水刺激引起胃黏膜内的HCO-3减少，从而对H+缓冲作用减弱，会使胃黏膜组织液的________降低，可引起胃黏膜损伤。
（4）胃黏膜可抵御致病微生物对机体的侵害，在机体________（填“特异性“或”非特异性"）免疫中发挥重要作用。
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人感染乳头瘤病毒（HPV）可诱发宫颈癌等恶性肿瘤。研究结构为评估某种HPV疫苗的效果，在志愿者中进行接种。一段时间后，统计宫颈癌出现癌前病变（癌变前病理变化,可发展为恶性肿瘤）的人数，结果见表。
(1)为制备该疫苗，将HPV外壳蛋白L1基因与________连接，导入受体细胞。受体细胞将目的基因转录，再以___________为原料翻译出L1蛋白。这样就获得疫苗有效成分。
(2)人体接种该疫苗后，________作为抗原刺激极体产生特异性抗体。一旦HPV侵入极体，______会迅速增殖分化，产生大量抗体。这些抗体与游离的HPV结合，阻止HPV_______。故A2组出现癌前病变比例明显低于对照组。
(3)B1组人群中出现癌前病变比例显著高于____组，据此推测HPV是诱发癌前病变的因素之一。
(4)B2组与B1组人群出现癌前病变比例没有明显差异，原因可能是该疫苗未能明显诱导_______清除体内HPV.
(5)综上所述，该疫苗可用于宫颈癌的___________。
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下图所示是温带草原生态系统食物网的一部分图解,请据图分析回答下列问题。
(1)该食物网含 条食物链,猫头鹰占有的营养级是 ,属于 级消费者。
(2)兔与鼠的关系是 ,蟾蜍与蜘蛛的关系是 。
(3)由于某种原因鼠突然死亡,短期内蛇和蟾蜍的数量变化情况依次是 。
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A．(生物技术实践，9分)生物乙醇是以生物为原料生产的可再生能源。我国利用农作物废弃物(秸秆)生产乙醇，其技术流程为：纤维素酶解→酵母发酵→蒸馏→-成品。
(1)纤维素酶的成本能否下降，是能否实现乙醇工业化生产的关键因素。纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程：土壤→取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养。
①最好选择怎样的环境采集土样?
②以下是一种培养基配方：纤维素粉5g、NaN031g、Na2HP04。7H201.2g、KH2P040.9g、MgSO4·7H2O0.5g、KCl0.5g、酵母膏0.5g、水解酪素0.5g(蒸馏水定容到1000ml)。该
培养基能够增加样品中纤维素分解菌的浓度，其原理是
③为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基上加入 染液，
将筛选获得的茵液稀释后用 方法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生透明圈的菌落作为菌种进行扩大培养。
④纤维素分解菌培养液中的纤维素酶产量如何呢?请设计实验进行检测。
(2)乙醇是酵母菌的发酵产物。发酵时酵母菌直接利用的物质是 。
(3)发酵时乙醇浓度升高会对酵母菌产生毒性，从而影响进一步的发酵。科学家利用基因工程方法创造出一种对乙醇浓度有高耐受力的酵母菌新菌种，该过程需采用PCR技术扩增目的基因。与体内DNA复制相比，PCR反应体系需加入哪两种特别的物质?
B．（现代生物科技，9分）下图是利用多种生物工程技术获得转基因牛的基本操作流程，请分析回答：
（1）在基因工程的操作程序中，基因工程的核心是 。
（2）在获取目的基因和构建目的基因表达载体的一个目的基因表达载体的组成包括标记基因和 。
（3）一般将受精卵作为目的基因的受体，将目的基因导入受精卵常用的方法C称 法。
（4）流程A和B分别指 和 。
（5）农场放牧要考虑环境承载力，牛粪可以用于沼气生产，它们分别应用了生态工程的_____和__________原理。
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