Question

8．微生物强化采油（MEOR）是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油粘度的原理，通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术．以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作．请回答下列问题：
（1）土壤是微生物的大本营，该类微生物应取自长期被石油污染（浸泡）的土壤．
（2）为筛选和纯化该类微生物，从功能上分，应选用选择培养基，此培养基中添加石油作为微生物生长的唯一碳源．培养基灭菌采用的最适方法是高压蒸汽灭菌．
（3）微生物的实验培养中，最常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法．
（4）接种后需密封培养，由此推测该微生物的细胞呼吸类型是无氧呼吸．培养一段时间后在培养基上形成降油圈，此时选取降油圈大的菌落就可获得高效菌株．

Answer 1

分析 1、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．
2、消毒和灭菌

	消毒	灭菌
概念	使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法	灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
适用对象	操作空间、某些液体、双手等	接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等

解答 解：（1）在长期被石油污染的土壤中生存下来的微生物，能降解石油，所以土壤取样时，应从含石油多的土壤中采集．
（2）从功能上，应选用特定的选择培养基进行筛选和纯化该类微生物；要筛选能降解石油的微生物，所用培养基应该以石油为唯一碳源的培养基；对培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌法．
（3）接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法．
（4）接种后需要密封培养，说明该生物的细胞呼吸类型为无氧呼吸；培养一段时间后在培养基上可形成降油圈，降油圈越大，说明该处的微生物降解石油的能力越强，所以应选择降油圈大的菌落进行培养以获得高效菌株．
故答案为：
（1）长期被石油污染（浸泡）
（2）选择      石油        高压蒸汽灭菌
（3）平板划线法        稀释涂布平板法
（4）无氧呼吸      降油圈大

点评 本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的成分、种类及功能；识记两种常用的几种方法；识记无菌技术，能根据题干要求准确答题．