Question

15．（1）在植物基因工程中，构建重组Ti质粒时，通常要用（同种）限制酶分别切割含目的基因的DNA分子和Ti质粒，再用DNA连接酶  进行连接．
（2）PCR反应过程中温度较高，为保证反应的进行，需要一种耐高温的TaqDNA聚合酶．该酶的化学本质为蛋白质，若要与其相对分子质量不同的蛋白质分离，一般采取凝胶色谱法，它是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质．
（3）动物细胞体外培养时，要保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境，在营养方面最终需在培养基中加入血清（或血浆） 等天然成分．细胞培养需在适宜的理化条件下进行，此外还需要一定的气体环境，其中C0₂的主要作用是维持培养液的PH．

Answer 1

分析 DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体．
动物细胞培养条件：
（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物．
（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．
（3）适宜的温度和PH
（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO₂（CO₂能够维持培养液的PH）．

解答 解：（1）在植物基因工程中，构建重组Ti质粒时，通常要用（同种）限制酶分别切割含目的基因的DNA分子和 Ti质粒，使它们产生相同的黏性末端，然后再用DNA连接酶进行连接．
（2）蛋白质的分离实验中，若要与其相对分子质量不同的蛋白质分离，一般采取凝胶色谱法，它是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质．
（3）动物细胞体外培养时，要保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境，在营养方面通常需要在培养基中加入 血清（或血浆）等天然成分．细胞培养需在适宜的理化条件下进行，此外还需要一定的气体环境，其中C0₂的主要作用是维持培养液的pH．
故答案为：
（1）（同种）限制酶   含目的基因的DNA分子  DNA连接酶
（2）凝胶色谱法    相对分子质量
（3）无菌、无毒     血清（或血浆）    维持培养液的PH

点评 本题考查了基因工程和细胞工程等有关知识，要求考生能够识记基因工程的工具酶及应用；识记动物细胞培养的培养条件以及培养基的成分等；掌握蛋白质提取和分离的原理和方法，属于简单题．