从土壤中分离自生固氮菌到制成临时装片的步骤是 A.观察→培养→接种→涂片 B.接种→观察→培养→涂片 C.培养→接种→观察→涂片 D.接种→培养→观察→涂片题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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从土壤中分离自生固氮菌到制成临时装片的步骤是（）

A.观察→培养→接种→涂片 B.接种→观察→培养→涂片

C.培养→接种→观察→涂片 D.接种→培养→观察→涂片

解析:

步骤是将表土制成的稀泥浆，接种到无氮培养基上进行培养，注意观察菌落的颜色变化，呈褐色时，制作临时涂片进行镜检。

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科目：高中生物 来源： 题型：

从土壤中分离自生固氮菌所依据的原理是（）

A．依据自生固氮菌的生长繁殖不需要氮源

B．依据自生固氮菌生长繁殖所需要的PH值

C．依据固氮菌易被结晶紫染成紫色

D．依据不同微生物代谢类型不同

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科目：高中生物 来源：2011届上海市卢湾区高三4月模拟考试生物试卷 题型：综合题

在土壤中存在多种自生固氮菌，它们对增加土壤中的氮素有重要意义。某实验小组试图从土壤中分离自生固氮菌，并制成菌肥施入土壤中增加土壤肥力。实验流程大致如下图所示。（11分）

56．图4中的培养基成分如下表：

C₆H₁₂O₆	KH₂PO₄	MgSO₄	NaCl	CaSO₄	蒸馏水	琼脂	pH
10g	0.2g	0.2g	0.2g	5g	1000mL	10g	7.0

此培养基的特点是______________，原因是____________________________
________________________________________________________________。
57．从功能上看，此培养基属于__________培养基。从形态上看，此培养基属于固体培养基，有利于__________________________________。
58．因为琼脂中常含有氮，因此使用前需要用自来水流水冲洗几天，再用________________浸泡，洗涤几次，以除去其中的氮。
59．实验步骤3在超净台上，将接种环在____________上灭菌冷却后，才能蘸取少许稀释液用点接法接种在培养基表面，也可采用_______法接种。接种后必须将培养皿_______________培养，以免冷凝水滴落。
60．实验的培养时间不宜过长，否则____________________________________
____________________________。
61.小组成员用放射线处理分离得到的固氮菌获得两个突变株A和B，然后对A和B进行实验，结果如下表。

接种的菌种	一般培养基	实验处理及结果
A	不生长	添加营养物甲，能生长
B	不生长	添加营养物乙，能生长
A+B	能生长	不添加营养物甲、乙就能生长

(1)突变株A不能在一般培养基上生长的直接原因是_____________________。
(2)将突变株A和B混合在一起接种于一般培养基中却能正常生长，那么最可
能原因是
。

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科目：高中生物 来源：2010-2011学年上海市卢湾区高三4月模拟考试生物试卷 题型：综合题

在土壤中存在多种自生固氮菌，它们对增加土壤中的氮素有重要意义。某实验小组试图从土壤中分离自生固氮菌，并制成菌肥施入土壤中增加土壤肥力。实验流程大致如下图所示。（11分）

56．图4中的培养基成分如下表：

C₆H₁₂O₆	KH₂PO₄	MgSO₄	NaCl	CaSO₄	蒸馏水	琼脂	pH
10g	0.2g	0.2g	0.2g	5g	1000mL	10g	7.0

此培养基的特点是______________，原因是____________________________

________________________________________________________________。

57．从功能上看，此培养基属于__________培养基。从形态上看，此培养基属于固体培养基，有利于__________________________________。

58．因为琼脂中常含有氮，因此使用前需要用自来水流水冲洗几天，再用________________浸泡，洗涤几次，以除去其中的氮。

59．实验步骤3在超净台上，将接种环在____________上灭菌冷却后，才能蘸取少许稀释液用点接法接种在培养基表面，也可采用_______法接种。接种后必须将培养皿_______________培养，以免冷凝水滴落。

60．实验的培养时间不宜过长，否则____________________________________

____________________________。

61.小组成员用放射线处理分离得到的固氮菌获得两个突变株A和B，然后对A和B进行实验，结果如下表。

接种的菌种	一般培养基	实验处理及结果
A	不生长	添加营养物甲，能生长
B	不生长	添加营养物乙，能生长
A+B	能生长	不添加营养物甲、乙就能生长

(1)突变株A不能在一般培养基上生长的直接原因是_____________________。

(2)将突变株A和B混合在一起接种于一般培养基中却能正常生长，那么最可

能原因是

。

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科目：高中生物 来源：同步题 题型：探究题

探究如何从土壤中分离自生固氮菌与计数。
实验原理：农田的表层土壤中，自生固氮菌的含量比较多。将用表层土壤制成的稀泥浆，接种到无氮培养基上进行培养。在这种情况下，只有自生固氮菌才能生长繁殖。用这种方法，可以将自生固氮菌与其他细菌分离开来。
材料用具：农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、盛9mL无菌水的大试管若干。无菌移液管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛90mL无菌水的锥形瓶、酒精灯、恒温箱。
方法步骤：
(1)倒平板。分别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板，应在___________操作。
(2)制备土壤稀释液。取土样10g加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。用无菌移液管吸取上清液1mL，转至9mL无菌水的大试管中，依次稀释到10⁷倍稀释度。为实现无菌操作，试管口和移液管应在离火焰____cm处。
(3)涂布。按照由107~103稀释度的顺序分别吸取0.1mL进行平板涂布，每个稀释度下，无氮培养基应至少涂布____个平板，牛肉膏蛋白胨培养基涂布____个平板。
(4)培养。放入恒温箱内，在适宜温度条件下培养3d～4d。一般每隔____小时统计一次，选取____时的记录作为结果，这样可以防止____。
(5)细菌的计数。当菌落数目稳定时，选取菌落数在___________的平板进行计数。如果测试的平均值为50，则每克样品中的菌落数是___________。(稀释度是10⁵)
(6)预期结果。相同稀释度下，牛肉膏蛋白胨平板上的菌落数____(填“多于”或“少于”)无氮培养基上的数目。理由是______________。

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