Question

17．请根据所学知识回答以下问题：
（1）有2位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数．在对应稀释倍数为10⁶的培养基中，得到以下2种统计结果：甲同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230；乙同学在该浓度下涂布了3个平板统计的菌落数分别为21、212、256，并且取平均值163作为统计结果；请评价这两位同学的实验结果的有效性
①甲同学是否合理：不合理，原因是没有设置重复组，结果不具有说服力．
②乙同学是否合理：不合理，原因是1个计数结果与另2个相差太远（或在操作过程中可能出现错误，或只简单地计算了平均值）．
③正确做法是在设计实验时，一定要涂布至少3个平板作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性．在分析实验结果时，一定要考虑所设置的重复组的结果是否相当，结果差距太大，意味着操作有误，需要重新实验
④稀释涂布平板法所用培养基按物理性质划分属于固体培养基；
⑤倒平板前保证培养基无杂菌的常用方法是用高压蒸汽灭菌．
（2）生物工程常需分离酵母菌和Taq耐热菌，分离方法常用选择培养基．例如用加高浓度食盐的适宜培养基，分离金黄色葡萄球菌．请提出从含细菌、酵母菌和Taq耐热菌的培养液中分离酵母菌和Taq耐热菌的方案．
⑥分离酵母菌用加青霉素的选择培养基分离酵母菌．
⑦分离Taq耐热菌用高温培养条件分离Taq耐热菌．

Answer 1

分析 1、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．
注：这两种方法中，稀释涂布平板法可用于微生物的计数．
2、消毒和灭菌

	消毒	灭菌
概念	使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法	灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
适用对象	操作空间、某些液体、双手等	接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等

解答 解：（1）①甲同学实验操作不合理，原因是只涂布了一个平板，未设置对照组．
②乙同学结果也不合理，因1个计数结果与另2个相差太远，不能简单的用其平均数．
③在设计实验时，一定要涂布至少3个平板作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性．在分析实验结果时，一定要考虑所设置的重复组的结果是否相当，结果差距太大，意味着操作有误，需要重新实验．
④因培养基中加了凝固剂琼脂，故按物理性质划分属于固体培养基．
⑤培养基灭菌的方法常用高温蒸汽灭菌法．
（2）⑥由于酵母菌为真菌，故可用加抗生素的选择培养基分离酵母菌．
⑦分离Taq耐热菌可根据该菌的特点用高温条件进行选择培养．
故答案为：
（1）①不合理       没有设置重复组，结果不具有说服力
②不合理       1个计数结果与另2个相差太远（或在操作过程中可能出现错误，或只简单地计算了平均值）
③在设计实验时，一定要涂布至少3个平板作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性．在分析实验结果时，一定要考虑所设置的重复组的结果是否相当，结果差距太大，意味着操作有误，需要重新实验
④固体  
⑤用高压蒸汽灭菌
（2）⑥用加青霉素的选择培养基分离酵母菌
⑦用高温培养条件分离Taq耐热菌

点评 本题的知识点是微生物培养过程中的无菌技术，分离微生物的方法，主要考查学生设计和完善实验步骤，分析实验结果获取结论的能力和提出问题进行进一步探究的能力，利用所学的微生物知识解决生活问题的能力．