Question

11．我市葡萄种植基地为解决葡萄滞销易腐烂问题，引进果酒、果醋生产线进行葡萄的深加工，获得了较好效益，其生产流程如图所示，据图回答：
（1）在筛选菌种A时，需要在接种前用高压蒸汽灭菌法对葡萄果汁进行灭菌．对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法．
（2）在纯化菌种A时接种了5个平板，每个平板均接种了0.1mL样品并培养．其中乙平板的菌落分布如图，纯化菌种A的接种方法是稀释涂布平板法，推测出现平板乙可能的操作失误是涂布不均匀．其余的甲、丙、丁、戊平板的菌落数分别是180、220、480、200，则样品中菌种A的数量为2000个/mL，用该方法统计的结果，一般低于（低于、高于）实际值．
（3）与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需添加生长素和细胞分裂素，这些植物激素一般需要事先单独配置成母液保存备用．
（4）将葡萄加工成果汁时，为提高果汁的产量和品质，应加入适量的果胶（果胶酶和纤维素）酶，该酶能破坏植物细胞的细胞壁（填细胞结构）．若用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离该酶，电泳迁移率完全取决于分子大小．

Answer 1

分析 1、微生物的实验室培养常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌、干热灭菌及灼烧灭菌．
2、微生物接种常用的方法有平板划线法和稀释涂布平板法，后者常用来统计活菌数，但统计的数目往往比实际值低，因为当两个或多个细菌连在一起时，往往统计的是一个菌落．
3、对于频繁使用的菌种常采用斜面保藏法，对于需要长期保存的菌种可以采用甘油管藏的方法．
4、分析题图：图示表示两种微生物的筛选、分离、纯化的过程及果酒和果醋的制作过程，其中候选菌A是酵母菌，候选菌B是醋酸（杆）菌．

解答 解：（1）培养基常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法；对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法．
（2）分析图乙中培养基培养结果，培养基中的菌落没有呈线性分布，可以推知采用的纯化方法是稀释涂布平板法；由于菌落有聚集现象，可以推知平板乙可能的操作失误是涂布不均匀，导致菌落分布很不均匀；根据题目中数据，丁培养基中的菌落数目偏差较大，可以舍去，统计甲、丙、戊三个培养基中的菌落数目，然后取平均值，为200个菌落，由于所取培养液体积为0.1ml，则样品中菌种A的数量为2000个/ml；由于稀释涂布平板法得到的菌落可能有两个细菌或多个细菌形成一个菌落的情况，因此最终得到的数值低于实际值．
（3）植物组织培养时，培养基中必须加入常常添加的植物激素有生长素和细胞分裂素，这些植物激素常常单独配制成母液保存．
（4）果胶酶包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等，它们能催化果胶的分解，瓦解植物细胞壁，从而使果汁变得澄清，提高产量和品质；凝胶电泳法分离蛋白质时，电泳迁移率取决于蛋白质分子量的大小．
故答案为：
（1）高压蒸汽灭菌   甘油管藏
（2）稀释涂布平板法    涂布不均匀   2000   低于
（3）细胞分裂素  母液 
（4）果胶（果胶酶和纤维素）  细胞壁   分子大小

点评 本题结合果酒、果醋生产流程图，考查微生物的筛选、分离和计数，果酒、果醋的制作，植物组织培养的知识，意在考查考生对所学知识的理解，把握知识间的内在联系的能力．