Question

5．如图为培育抗病转基因植物操作过程，请回答下列问题：

（1）抗病基因与载体结合常用相同的限制酶和DNA连接酶处理，获得的重组运载体通过显微注射方法导入球形原生质体中．
（2）图中①表示脱分化，培养过程中需保持无菌，防止杂菌污染，愈伤组织需适当配比的营养物质和生长调节剂诱导．
（3）抗病转基因植物获得的原理是基因重组和植物细胞全能性．

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
图示表示培育抗病转基因植物的过程，其原理是植物细胞具有全能性，其中①是脱分化过程．

解答 解：（1）用同种限制酶切割能形成相同的黏性末端，在DNA连接酶的作用下可形成重组DNA．获得的重组运载体通过显微注射方法导入原生质体中．由于原生质体外没有细胞壁，呈现球形．
（2）图中①表示脱分化，培养过程中需保持无菌，防止杂菌污染，愈伤组织需适当配比的营养物质和生长调节剂诱导．
（3）获得抗病转基因植物需要基因工程技术和植物组织培养技术，相关的原理是基因重组和植物细胞全能性．
故答案为：
（1）相同的限制酶和DNA连接酶     显微注射     球
（2）脱分化    无菌     营养物质
（3）基因重组和植物细胞全能性

点评 本题结合流程图，考查植物组织培养和基因工程的相关知识，意在考查考生的识图能力和识记能力；能理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，对生物学问题作出准确判断的能力．