Question

11．回答下列有关生物工程技术问题．
（1）在基因工程中，构建重组Ti质粒时，通常要用（同种）限制酶分别切割含目的基因的DNA分子和Ti质粒，再用DNA连接酶进行连接．整合了目的基因的重组质粒，在组成上还含有启动子、终止子和标记基因．
（2）体内受精作用进行时防止多精入卵的机制有透明带反应和卵细胞膜反应．
（3）动物细胞体外培养时，要保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境，在营养方面通常需要在培养基中加入血清（或血浆）等天然成分．细胞培养需在适宜的理化条件下进行，此外还需要一定的气体环境，其中C0₂的主要作用是维持培养液的pH．
（4）植物组织培养技术的理论依据是植物细胞具有全能性；在该技术应用的过程中，关键步骤是利用含有一定营养和激素的培养基诱导植物细胞进行脱分化和再分化．

Answer 1

分析 DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体．
动物细胞培养条件：
（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物．
（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．
（3）适宜的温度和PH．
（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO₂（CO₂能够维持培养液的PH）．

解答 解：（1）在植物基因工程中，构建重组Ti质粒时，通常要用（同种）限制酶分别切割含目的基因的DNA分子和Ti质粒，使它们产生相同的黏性末端，然后再用DNA连接酶进行连接．重组质粒在组成上含有启动子、终止子和标记基因．
（2）体内受精作用进行时防止多精入卵的机制有透明带反应和卵黄膜封闭作用． 1
（3）动物细胞体外培养时，要保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境，在营养方面通常需要在培养基中加入 血清（或血浆）等天然成分．细胞培养需在适宜的理化条件下进行，此外还需要一定的气体环境，其中C0₂的主要作用是维持培养液的pH．
（4）植物组织培养技术的理论依据是植物细胞具有全能性；在该技术应用的过程中，关键步骤是利用含有一定营养和激素的培养基诱导植物细胞进行脱分化和再分化．
故答案为：
（1）（同种）限制酶     含目的基因的DNA分子    Ti质粒    DNA连接酶   标记基因
（2）透明带反应     卵细胞膜反应
（3）无菌、无毒     血清（或血浆）   维持培养液的pH
（4）植物细胞具有全能性  脱分化   再分化

点评 本题考查了基因工程和细胞工程等有关知识，要求考生能够识记基因工程的工具酶及应用；识记动物细胞培养的培养条件以及培养基的成分等；识记受精作用过程中的防止多精入卵的机制，属于简单题．