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    若要利用某目的基因(图甲)和P1噬菌体载体(图乙)构建重组DNA(图丙)，限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ(A?GATCT)、EcoRⅠ(G?AATTC)和Sau3AⅠ(?GATC)。下列分析合理的是(??? )

    A．用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体

    B．用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体

    C．用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体

    D．用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体

     

    【答案】

    D

    【解析】解答本题的关键是要看准切割后目的基因插入的方向，只有用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体，构建的重组DNA中RNA聚合酶在插入的目的基因上的移动方向才一定与图丙相同。

     

    练习册系列答案
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    科目：高中生物 来源：2011-2012学年河南省宜阳一高高二3月月考生物试卷 题型：综合题

    回答有关基因工程的问题：（9分）
    （1）   构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生   _   末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生_____（相同，不同）粘性末端的限制酶。
    （2）  利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是                                                    。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用   处理大肠杆菌，以利于表达载体进入：为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的          片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为                 。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成                _，常用抗原-抗体杂交技术。
    （3）  如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的       _    中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的       _上。

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    科目：高中生物 来源：2014届辽宁朝阳柳城高中高二下学期期中考试生物试卷（解析版） 题型：综合题

    回答基因工程的有关问题：(共9分)

    （1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生黏性末端，也可能产生_____末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生_____（相同，不同）黏性末端的限制酶。

    （2）利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因等，其中RNA聚合酶识别和结合的部位是_____。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用_____处理大肠杆菌，以利于表达载体进入。为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用放射性同位素标记的______ 作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为______。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成胰岛素，常用______          技术。

    (3)如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的_____中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的______上。

     

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    科目：高中生物 来源：2013届辽宁省盘锦市高二下学期期初考试生物试卷（解析版） 题型：综合题

    （14分）回答有关生物工程的问题：

    （1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生__末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生_（相同不同）粘性末端的限制酶。

    （2）利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是提供________特异性识别结合位点，驱动基因转录。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用___处理大肠杆菌，以利于表达载体进入：为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与__________杂交，该杂交技术称为_________。

    （3）如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的______中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将_____插入植物细胞的染色体___上。

    (4)家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_________和___________之间。

    (5)采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。改PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________。

    (6)利用生物反应器培养家蚕细胞时，细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以_________________增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。

     

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    科目：高中生物 来源：2013届河南省高二3月月考生物试卷 题型：综合题

    回答有关基因工程的问题：（9分）

    （1） 构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生   _    末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生_____（相同，不同）粘性末端的限制酶。

    （2）利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是                                                     。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用    处理大肠杆菌，以利于表达载体进入：为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的           片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为                  。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成                 _，常用抗原-抗体杂交技术。

    （3）如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的       _     中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的        _上。

     

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