Question

【题目】Bt基因即苏云金芽孢杆菌(Badcillusthuringiensis，简称Bt)基因，因其表达产物Bt毒蛋白杀虫效果好、安全、高效等优点而成为应用最为广泛的转杀虫基因。如图为培育转Bt基因苗的基本操作过程。

（1）Bt基因可从构建的Bt基因组文库中获取，也可以从其cDNA文库中获取，从前者获取的基因__________（填“含有”或“不含有”）启动子。若利用PCR技术扩增Bt基因，此过程中Taq酶所起的作用是____________________________________。

（2）步骤IV中产生的细胞团称为________________，步骤IV和V过程要注意控制培养基中_____________________________的浓度比例，以便获得幼苗。

（3）我国西北的一些地区年降雨量很小，只适宜种植少数的草本植物，但却被硬性规定种植转Bt基因的植物，结果造成减产。这个案例主要违背了生态工程的_______________原理。

（4）蛋白质工程也被称为_________________，其基本途径是从_______________出发，通过设计预期的蛋白质结构和推测应有的氨基酸序列，进而找到相对应的_______________，据此获得基因，再经表达、纯化获得蛋白质，之后还需要对蛋白质的生物功能进行鉴定。

Answer 1

【答案】含有保证在高温条件下从引物起始进行DNA子链的合成愈伤组织生长素与细胞分裂素协调与平衡第二代基因工程预期的蛋白质功能脱氧核苷酸序列

【解析】

1、步骤Ⅰ是剪切幼龄叶片的部分组织；步骤Ⅱ是外植体消毒；步骤Ⅲ是利用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞；步骤Ⅳ是在适宜培养基中诱导外植体脱分化形成愈伤组织。步骤Ⅴ是愈伤组织经过再分化形成植株。

2、蛋白质工程的流程图如下图所示

（1）Bt基因组文库包括苏云金芽孢杆菌的全部基因，是包含启动子的。若利用PCR技术扩增Bt基因，Taq酶能够保证在高温条件下从引物起始进行DNA子链的合成。

（2）步骤IV在适宜培养基中诱导外植体脱分化形成愈伤组织，图示中的细胞团称为愈伤组织。步骤IV和V过程分别是脱分化和再分化的过程，需要要注意控制培养基中生长素和细胞分裂素的浓度比例，以便获得幼苗。

（3）生态工程的原理包括物质循环再生原理、物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理、体统学和工程学原理、系统整体性原理。我国西北的一些地区不适合种植转Bt基因的植物，却被硬性规定种植，结果造成减产的案例主要违背了生态工程的协调与平衡原理。

（4）由于蛋白质工程是在基因工程的基础上发展起来的，在技术方面有很多同基因工程技术相似的地方，因此也被称为第二代基因工程。其基本途径是从预期的蛋白质功能出发，通过设计预期的蛋白质结构和推测应有的氨基酸序列，进而找到相对应的脱氧核苷酸序列，据此获得基因，再经表达、纯化获得蛋白质，之后还需要对蛋白质的生物功能进行鉴定。