Question

【题目】研究人员从血管内皮瘤中发现了一种新的血管增生抑制剂——内皮抑素，它能有效地抑制 血管增生，他们利用基因工程技术，将内皮抑素基因转移到了酵母菌中使之表达并分泌，图 示 EcoRⅠ、BamHⅠ、PstⅠ三种限制酶在质粒和含内皮抑素基因的外源 DNA 片段上的切 割位点，回答下列问题：

（1）根据上述信息，该基因工程技术的目的基因_____，为与质粒 DNA重组，目的基因和质粒 DNA 均应用限制酶_____切割。

（2）下列关于质粒运载体的说法错误的是（________）

A．使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解

B．质粒运载体只能在与目的基因重组后进入细胞

C．质粒运载体可能是从细菌或者病毒的 DNA 改造的

D．质粒运载体的复制和表达也遵循中心法则

E．质粒运载体只有把目的基因整合到受体细胞的 DNA 中才能表达 F．没有限制酶就无法使用质粒运载体

（3）若内皮抑素是一种酶，制备的合理工艺步骤应为_____(选择正确的序号并排序)。

①过滤 ②沉淀 ③破碎 ④干燥 ⑤提纯

（4）固定化酶是从 20 世纪 60 年代迅速发展起来的一种技术。东北农业大学科研人员 利用双重固定法，即采用戊二醛作交联剂(使酶相互连接)，海藻酸钠作为包埋剂来固定小麦 酯酶，研究固定化酶的性质，并对其最佳固定条件进行了探究。图显示的是部分研究结 果(注：酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率，包括酶活性和酶的数量)。

从甲图所示结果可以得出的结论是________, 乙图曲线表明浓度为_____的海藻酸钠包埋效果最好，当海藻酸钠浓度较低时，酶活 力较低原因可能是_________。

Answer 1

【答案】内皮抑素基因 BamHⅠ B C E ①②⑤④ 固定化酯酶比游离酯酶对温度的变化适应性和酶活力更强 3% 海藻酸钠浓度较低时包埋不紧密，酶分子容易漏出，数量不足

【解析】

1-3题考查了基因工程技术，目的基因的获得方法有三种：从基因文库中获取、PCR技术扩增、人工合成法；基因表达载体中的LacZ基因被插入灭活。

4题考查固定化酶技术，图甲中固定化酶与游离酶相比，对温度变化的适应性更强且应用范围较广。图乙曲线表明浓度为3%的海藻酸钠包埋效果最好，此时的酶活力最高；当海藻酸钠浓度较低时包埋不紧密，酶分子容易漏出，数量不足，因此酶活力较低。如果制作的凝胶珠颜色过浅，呈白色，则说明海藻酸钠浓度过低。

（1）由题意知：内皮抑素基因属于该基因工程的目的基因，为与质粒DNA重组，目的基因和质粒DNA均应用限制酶BamHI切割，暴露相同的黏性末端。

（2）A．使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解，A正确；

B、无论与目的基因重组与否，质粒运载体都能进入宿主细胞，B错误；

C、质粒通常是来自细菌，病毒没有质粒，因此质粒运载体可能是从细菌的DNA改造形成的，C错误；

D、质粒运载体的复制和表达也遵循中心法则，D正确。

E、质粒运载体在受体细胞的DNA中能独立表达，E错误；

F、质粒作为运载体，必须有限制酶的切割位点，才能与目的基因整合重组，F正确。

故选BCE。

（3）酶制备的合理工艺步骤应为①过滤→②沉淀→⑤提纯→④干燥。

（4）通过分析图甲可知，固定化酶与游离酶相比，对温度变化的适应性更强且应用范围较广，图乙曲线表明浓度为3%的海藻酸钠包埋效果最好，此时酶活力最高。当海藻酸钠浓度较低时包埋不紧密，酶分子容易漏出，数量不足，因此酶活力较低