Question

【题目】苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。图1是转Bt毒素蛋白基因植物的重组DNA形成过程示意图；图2是毒素蛋白基因进入植物细胞后发生的两种生物大分子合成的过程，据图回答下列问题。

（1）将图1①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有_____种DNA片段。过程②需要用到DNA连接酶，与T4 DNA连接酶相比，E.coli DNA连接酶在作用上的不同是________________

（2）图1中形成重组质粒时可用HindⅢ和BamH Ⅰ进行切割后连接，与用一种酶（BamH Ⅰ）酶切后连接相比，这样做的好处是______________________________。（列出2点）

（3）图2中链是______。不同组织细胞的相同DNA进行过程③时启用的起始点______（“都相同”、“都不同”、“不完全相同”），其原因是__________________。

（4）要想检测Bt毒蛋白基因是否翻译成蛋白质，在分子水平上可用______法进行检测。

Answer 1

【答案】4种，E.coli DNA连接酶只能将双链DNA片段互补的粘性末端连接起来 防止目的基因或质粒自连 防止目的基因和质粒的任意连接 mRNA 不完全相同 不同组织细胞中基因会进行选择性表达 抗原-抗体杂交

【解析】

本题以转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图为载体，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作工具及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合图中信息准确答题，属于中等难度题。1.由于HindⅢ与BamHⅠ两种限制酶酶切形成的黏性末端不一样，图中①中的DNA同时被这两种限制酶切割后产生四种基因片段；2.图2表示基因的表达，DNA转录形成信使RNA（α链），翻译形成多肽链。

（1）图中①的DNA含有两个BamHⅠ酶的切割位点，含有一个HindⅢ酶的切割位点，所以用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切①中的DNA后，反应管中有4种DNA片段，与T4DNA连接酶相比，E.coli DNA连接酶在作用上的不同是E.coli DNA连接酶只能将双链DNA片段互补的粘性末端连接起来。
（2）形成重组质粒时可用HindⅢ和BamHⅠ进行切割后连接，与用一种酶（BamHⅠ）酶切后连接相比，可以防止目的基因和质粒的自身环化、防止目的基因和质粒的任意连接。
（3）从图2可知，a链形成是以DNA一条链作为模板进行转录形成的信使RNA分子；不同组织细胞的相同DNA在转录时，如果是相同基因一般转录起点相同，不同的基因转录起点不同，原因是基因的选择性表达。
（4）要想检测Bt毒蛋白基因是否翻译成蛋白质，在分子水平上可用抗原-抗体杂交。