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    （15分）回答有关基因工程的问题：

    （1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生 末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生 （相同，不同）粘性末端的限制酶。

    （2）利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是 。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用 处理大肠杆菌，以利于表达载体进入：为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为 。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成 _，常用抗原-抗体杂交技术。

    （3）如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的 _中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的 _上。

    (除标注外，每空2分，共15分)

    （1）平 相同（1分）

    （2）提供RNA聚合酶特异性识别结合位点，驱动基因转录 Ca2+ DNA—RNA分子杂交 胰岛素原（蛋白质）

    （3） T—DNA 染色体

    【解析】

    试题分析：（1）限制酶切割DNA后，其结果可能产生粘性末端，也可能产生平末端。DNA连接酶是将具有相同粘性末端的DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，所以若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生相同粘性末端的限制酶。

    （2）启动子位于基因的首端，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需要的蛋白质，所以启动子的作用是提供RNA聚合酶特异性识别结合位点，驱动基因转录。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用Ca2+处理大肠杆菌。检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可采用DNA—RNA分子杂交技术。胰岛素基因转录的mRNA的翻译产物是胰岛素原（蛋白质）。

    （3）采用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的T—DNA中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞中的染色体DNA上。

    考点：本题考查基因工程的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。

    练习册系列答案
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    科目：高中生物 来源：2014-2015学年江西省高三下学期第三周周考理综生物试卷（解析版） 题型：综合题

    （15分）Ⅰ.土壤农杆菌能将自身Ti质粒的T-DNA整合到植物染色体DNA上，诱发植物形成肿瘤。T-DNA中含有植物生长素合成酶基因（S）和细胞分裂素合成酶基因（R）,如图1所示，它们的表达与否能影响相应植物激素的含量，进而调节肿瘤组织的生长与分化。基因工程常用Ti质粒作为运载体，图2表示抗虫棉培育中使用的三种限制酶A、B、C的识别序列以及Ti质粒上限制酶切割位点的分布，抗虫基因内部不含切割位点，两侧标明序列为切割区域。

    （1）据图2分析，切取抗虫基因时，使用限制酶 ，切割Ti质粒时，使用限制酶 。

    （2）成功建构的重组质粒含有限制酶A的识别位点 个，若用酶C处理该重组质粒，将得到 个DNA片段。

    （3）若抗虫基因插入的位置在R基因内部，筛选出 植株即是成功导入抗虫基因的棉花植株。

    Ⅱ.单克隆抗体技术在生物工程中占有重要地位。请回答相关问题：

    （4）科学家米尔斯坦和柯勒提出单克隆抗体制备技术的实验方案：把一种 细胞与能在体外大量增殖的 细胞进行诱导融合，使融合细胞既能大量增殖，又能产生足够数量的特定抗体。

    （5）在技术操作中，需要将融合细胞用 培养基进行筛选，并进行克隆化培养和 检测，以得到足够数量的符合要求的 （填“单”、“双”、“多”）核杂交瘤细胞。

    （6）若将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，可从 中提取出大量的单克隆抗体。

    （7）研究人员应用 ，改造了鼠源性抗体分子的结构，降低了鼠源性抗体的人体反应。

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    科目：高中生物 来源：2014-2015学年广东省江门市高三3月模拟考试生物试卷（解析版） 题型：选择题

    据图分析，下列叙述错误的是

    A.与纤维母细胞相比，过程①形成的诱导干细胞的全能性表现能力较高

    B.过程②是诱导干细胞基因选择性表达的结果

    C.过程③中细胞的融合具有随机性

    D.过程④制备的单克隆抗体能高效治疗多种疾病

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    科目：高中生物 来源：2014-2015学年山东省潍坊市高三第一次模拟考试理综生物试卷（解析版） 题型：综合题

    （12分）科学家仅使用小分子化合物的组合对体细胞进行处理，成功地将已高度分化的小鼠成纤维上皮细胞诱导成多潜能干细胞，并将其命名为化学诱导的多潜能干细胞（GiPS细胞）。下图是利用GiPS细胞对镰刀型细胞贫血症小鼠进行基因治疗的技术流程：

    请据图回答：

    （1）过程①中，在培养液中加入___________使上皮组织细胞彼此分散，若用传代培养的细胞应不超过10代，以保证细胞的________________不发生变化。

    （2）科学家用小分子化合物的组合对小鼠成纤维上皮细胞进行处理，促使已经__________的成纤维上皮细胞“重新编程”产生GiPS细胞，这些GiPS细胞与囊胚中__________细胞性质相同。

    （3）过程③中，导入的重组质粒中调控目的基因表达的组件是______________，____________的作用是鉴别和筛选含有目的基因的受体细胞。

    （4）若利用GiPS细胞诱导分化形成______________，再经_________________技术，可较容易得到高等动物的体细胞克隆个体。

    （5）GiPS细胞经过体外诱导分化，可以培育出人造组织器官。图中培育的骨髓造血干细胞移植回该小鼠体内与异体骨髓造血干细胞移植相比，最大的优点是__________________。

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    科目：高中生物 来源：2014-2015学年山东省潍坊市高三第一次模拟考试理综生物试卷（解析版） 题型：选择题

    植物激素在植物生命活动中起重要作用，下列有关叙述正确的是

    A．植物激素直接参与细胞内的代谢活动

    B．在果实的发育过程中生长素和乙烯的作用相同

    C．脱落酸既能促进叶片衰老，也能促进细胞分裂

    D．赤霉素既能促进细胞伸长，也能促进种子萌发

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    科目：高中生物 来源：2014-2015学年河南省高三下学期第一次月考理综生物试卷（解析版） 题型：综合题

    （共10分）下图甲曲线表示在温度为25 ℃(该温度是该作物光合作用的最适温度, 而呼吸作用的最适温度为30 ℃)，水分和无机盐均适宜的条件下，温室内光照强度与作物光合速率的关系，图乙是某同学“探究影响植物光合速率的因素”的实验装置。试回答下列问题：

    （1）图甲曲线中，当光照强度为A时，叶肉细胞中产生ATP的细胞器有 ，其中叶绿体吸收CO2的量等于 。

    （2）当E>C时，可采取 措施，保证作物的最大光合速率。若遇阴天，温室需补光，选用 光最有效。当E=B时，若往温室内充入14CO2, 则14C的转移途径是 （用“→”表示）。

    （3）在其他条件不变的情况下，将温度调节到30℃，图甲曲线中a点和A点的移动方向分别是 。

    （4）图乙装置可用来探究光照强度对光合速率的影响，若实验中每隔5 min改变一次试管与玻璃柱之间的距离，随着距离的增加，气泡产生速率下降，产生这一结果的原因是

    ① ；

    ② 。

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    科目：高中生物 来源：2014-2015学年河南省焦作市高三上学期期中学业水平测试生物试卷（解析版） 题型：综合题

    如图是基因型为AaBb的菊花茎尖离体培养示意图，据图回答下列问题：

    （1）图中A是__________。B是__________。菊花茎尖培养成植物体的根本原因是____________________。

    （2）菊花的组织培养过程中，细胞增殖通过__________分裂来完成。要促进茎尖细胞分裂和生长，培养基中应有__________两类激素。

    （3）脱分化和再分化这两个过程的进行还需要维持一定的外界条件，一是要有适宜的__________，二是要__________。否则植物组织培养就不能成功。

    （4）这样培养成的试管苗的基因型是__________，这种繁殖方式__________。

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    科目：高中生物 来源：2014-2015学年河南省焦作市高三上学期期中学业水平测试生物试卷（解析版） 题型：选择题

    下列说法正确的有

    ①细胞分化是多细胞生物个体发育的基础，使细胞趋向专门化，有利于提高各种生理功能的效率 ②减数分裂产生多样性的生殖细胞和受精时精卵细胞的随机结合是有性生殖优于无性生殖的基础 ③温室条件下，通过增施农家肥可以提高农作物对有机物的吸收 ④细胞的遗传物质均是脱氧核糖核苷酸 ⑤细胞核是真核细胞生命活动的控制中心⑥细胞之间的信息交流均依赖于细胞膜上的特异性受体

    A．3项 B．4项 C．5项 D．6项

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    科目：高中生物 来源：2014-2015学年江西省盟校高三第一次十校联考理综生物试卷（解析版） 题型：综合题

    （9分）为探究2,4—D溶液浓度对迎春枝条生根的影响，某同学首先按照图一所示步骤配制了一系列浓度梯度的2,4—D溶液，然后选择插条，分组、编号，浸泡枝条，适宜条件培养，得到实验结果如图二所示。图三是迎春幼苗横放后根和茎的生长情况。请回答下列问题：

    （1）由图一分析可知，对5号烧杯中的2，4-D溶液的操作还应 ，该操作体现了 原则。

    （2）从图二可确定促进迎春枝条生根的最适生长素类似物浓度在 mol/L之间，图中对根的生长起抑制作用的生长素类似物浓度是 mol/L。

    （3）图二、图三的的实验结果能体现生长素作用具有两重性特点的是图 ；a、b、c、d四处中，生长素类似物可能对植物生长起抑制作用的是________处。

    （4）为验证重力作用下生长素的横向运输发生在尖端，而不是尖端以下部分。某同学的实验设计思路是：将生长状况相同的完整胚芽鞘均分成A、B两组；A组不做任何处理作对照，B组切去尖端；两组胚芽鞘在适宜条件下水平放置一段时间后观察弯曲情况。

    请你对该同学的实验思路作出评价。如果可行，叙述实验结果；如果不可行，请选择胚芽鞘、云母片、琼脂块等为材料，叙述或图解表示改进方法。（3分）

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