Question

14．如图是人体免疫物质的培养方法，①～⑥表示不同的过程，请回答．

（1）方法1中，细胞A应具备的特点是能无限增殖．体外培养细胞 Y 需要满足以下条件：无菌、无毒、添加了血浆（或“血清”）的培养基、适宜温度与pH、含5%C0₂、95%空气的气体环境等．
（2）方法2中，通过④得到的目的基因与细胞B中原有基因不一定（一定/不一定）相同，⑤过程必须用到的工具酶有限制性核酸内切酶（限制酶）和DNA连接酶，结构甲的组成必须包括启动子、终止子、标记基因及目的基因等．
（3）若用棉花生产抗体2，⑥过程的受体细胞应选用土壤农杆菌，经过一系列的过程得到再生植株．要确认该抗体基因是否在再生植株中正确表达，通常采用抗原-抗体杂交法，在田间试验中检测植株是否含有该种抗体．

Answer 1

分析 分析图解可知，方法1表示利用动物细胞融合的方法制备单克隆抗体，其中细胞A为骨髓瘤细胞，细胞B为已免疫的浆细胞，融合得到的Y细胞为杂交瘤细胞．
方法2表示利用基因工程的方法制备抗体，其中③表示从浆细胞中获取抗体的mRNA，④表示利用反转录的方法获取目的基因，⑤表示目的基因和质粒构建重组质粒，⑥表示将目的基因导入受体细胞．

解答 解：（1）分析图解可知，方法1表示利用动物细胞融合的方法制备单克隆抗体，其中细胞A为骨髓瘤细胞，即细胞A应该具备无限增殖的特点．体外培养杂交瘤细胞需要满足以下条件：无菌、无毒、添加了血浆（或“血清”）的培养基、适宜温度与pH、含5%C0₂、95%空气的气体环境等．
（2）方法2中，④表示利用反转录的方法获取目的基因，由于mRNA只是由基因编码区的外显子转录而来的，因此通过④得到的目的基因与细胞B中原有基因相比，不含有非编码区和内含子；⑤表示目的基因和质粒构建重组质粒，该过程必须用到的工具酶有限制性核酸内切酶（限制酶）和DNA连接酶，基因表达载体的组成必须包括启动子、终止子、标记基因及目的基因等．
（3）若用棉花生产抗体2，目的基因导入受体细胞过程的受体细胞应选用土壤农杆菌，经过一系列的过程得到再生植株．要确认该抗体基因是否在再生植株中正确表达，通常采用抗原-抗体杂交法，在田间试验中检测植株是否含有该种抗体．
故答案为：
（1）能无限增殖   无菌、无毒     含5%C0₂、95%空气
（2）不一定   限制性核酸内切酶（限制酶）和DNA连接酶    启动子、终止子、标记基因
（3）土壤农杆菌   抗原-抗体杂交

点评 本题利用流程图的形成考查了单克隆抗体的制备和基因工程的有关知识，要求考生能够根据单克隆抗体制备和基因工程的过程判断图中数字表示的操作过程、字母表示的细胞名称，同时识记基因工程的工具酶，识记动物细胞培养的条件等相关知识．