Question

5．用新鲜苹果榨取果汁并制作果酒，其流程如下：
新鲜苹果→清洗干净→去掉果核→榨汁机榨汁→果汁从成品果酒中分离酵母菌→扩大培养→固定化酵母细胞→发酵→果酒
（1）若榨取的果汁非常浑浊，解决方法是用果胶酶处理．
（2）根据培养基的功能特点，分离酵母菌应使用选择培养基，固定化酵母细胞常采用包埋法，若想使这些酵母细胞能反复使用，需注意无菌条件（避免微生物的污染）．
（3）若想检测果酒中酵母菌的密度，可采用稀释涂布平板或显微计数法法．
（4）欲长久保留酵母菌，可将菌液甘油冷藏保存．
（5）若果酒放置一段时间后，有明显酸味，最可能的原因是醋酸菌有氧呼吸，果酒转变成果醋．

Answer 1

分析 1、培养基按功能分：

种类	制备方法	特征	用途
选择培养基	培养基中加入某种化学成分	根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率	加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌
鉴别培养基	加入某种试剂或化学药品	依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计	鉴别和区分菌落相似的微生物伊红和美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌

2、统计菌落数目的方法
（1）显微镜直接计数法
 ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数； ③缺点：不能区分死菌与活菌．
（2）间接计数法（活菌计数法）
 ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌．通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌．
②操作
a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性．
b、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数．
③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数．
3、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型．果酒制作的原理：
（1）在有氧条件下，反应式如下：C₆H₁₂O₆+6H₂O+6O₂$\stackrel{酶}{→}$6CO₂+12H₂O+能量；             
（2）在无氧条件下，反应式如下：C₆H₁₂O₆$\stackrel{酶}{→}$2CO₂+2C₂H₅OH+能量．
4、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型．果醋制作的原理：
当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸．
当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸．

解答 解：（1）若榨取的果汁非常浑浊，可用果胶酶处理．
（2）培养基按功能分为选择培养基和鉴定培养基，分离酵母菌应使用选择培养基；固定化酵母细胞常采用包埋法，若想使这些酵母细胞能反复使用，需注意无菌条件（避免微生物的污染）．
（3）若想检测果酒中酵母菌的密度，可采用稀释涂布平板或显微计数法．
（4）欲长久保留酵母菌，可将菌液 甘油冷藏保存．
（5）若果酒放置一段时间后，有明显酸味，最可能的原因是 醋酸菌有氧呼吸，果酒转变成果醋．
故答案为：
（1）用果胶酶处理
（2）选择　　包埋　　无菌条件（避免微生物的污染）
（3）稀释涂布平板  或 显微计数法
（4）甘油冷藏
（5）醋酸菌有氧呼吸，果酒转变成果醋

点评 本题考查微生物的分离和培养、果酒和果醋的制作，要求考生识记培养基的成分及种类；识记计数微生物的方法；识记果酒和果醋制作的原理，能结合所学的知识准确答题．