Question

【题目】人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：

(1)从______________中可获取不具有启动子的htPA基因，再通过________技术使其数量大量增加。

(2)过程①需将 htPA基因与载体用________________切割后，再通过________________连接，来构建____________________。

(3)过程②常用______________技术将目的基因导入受体细胞中，受体细胞通常采用____________。

(4)为了在羊乳中获取目的基因表达产物，还需要在目的基因的首端加上特殊的调控组件：_______________________。欲知羊乳中是否含有人组织纤溶酶原激活物，需使用_______________对其进行检验。

Answer 1

【答案】cDNA文库（部分基因文库） PCR 同种限制酶 DNA连接酶 基因表达载体 显微注射 受精卵 乳腺蛋白基因的启动子 相应抗体

【解析】

据图分析，①表示基因表达载体的构建，②表示将目的基因导入受体细胞，③表示早期胚胎培养，④表示胚胎移植，⑤表示妊娠分娩获得转基因母羊，⑥表示从分泌的羊乳中获取htPA。

（1）从cDNA文库中获得的目的基因（htPA）是经过反转录获得的，母羊启动子；利用PCR技术可以获得大量的htPA基因。

（2）过程①表示基因表达载体的构建，先用同一种限制酶切割htPA基因与载体，在利用DNA连接酶将两者连接起来构成基因表达载体。

（3）②表示将目的基因导入受体细胞（动物细胞），常用的受体细胞是受精卵，常用的方法是显微注射法。

（4）根据题意分析，为了在羊乳中获取目的基因表达产物，应该将目的基因与乳腺蛋白基因的启动子组合在一起；检测目的基因的产物一般用抗原-抗体杂交技术，因此欲知羊乳中是否含有人组织纤溶酶原激活物，需使用相应抗体对其进行检验。