Question

【题目】根据生物技术的相关知识，回答下列问题：

（1）用葡萄制做的果酒酒味纯正，放置一段时间后，发现果酒带有明显的酸味，原因是________________。果酒发酵结束后，为方便后续使用，可将菌液转移到甘油中，与之充分混匀后，放在-20℃的冷冻箱中长期保存，此方法叫________________。

（2）泡菜酸甜香脆，但其腌制过程中会产生亚硝酸盐。测定泡菜中亚硝酸盐含量的操作包括：配制溶液、制备________________、制备________________、比色。

（3）制作果汁时常加入果胶酶，因为果胶酶可以将果胶分解成可溶性的________使果汁澄清。由于溶液中的酶很难回收，为了降低成本，使果胶酶能被再次利用一般采用物理吸附法或________法将其固定。

（4）科研人员发现某种微生物中富含活性高的果胶酶，获得酶溶液后一般用________法粗分离、用凝胶色谱法进行纯化，测定该果胶酶分子量最常用的方法是________________。

（5）上图是纯化时样品的加入与洗脱示意图，从图中可以看出，正确的加样操作是用吸管小心的将样品__________加样，正确的操作次序是__________（填序号）。

Answer 1

【答案】密封不严，醋酸菌进行有氧呼吸．将果酒转变成果醋 甘油管藏法 标准显色液 样品处理液 半乳糖醛酸 化学结合法 透析 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 贴着管壁 ③①④②

【解析】

1、透析袋是利用半透膜制作的，半透膜可以让小分子可以自由进出，而大分子不能通过。

2、凝胶色谱法是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量较大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快。

（1）用葡萄制做的果酒酒味纯正，放置一段时间后，发现果酒带有明显的酸味，原因是密封不严，醋酸菌进行有氧呼吸，将果酒转变成果醋，果酒发酵结束后，为方便后续使用，可将菌液转移到甘油中，与之充分混匀后，放在-20℃的冷冻箱中保存，此方法叫做甘油管藏。

（2）测定泡菜中亚硝酸盐含量的操作包括：配制溶液、制备标准显色液、制备样品处理液、比色。

（3）果胶酶可以将果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸使果汁澄清。由于溶液中的酶很难回收，为了降低成本，使果胶酶能被再次利用一般采用物理吸附法或化学结合法将其固定。

（4）果胶酶的化学本质是蛋白质，故获得酶溶液后一般用透析法法粗分离、用凝胶色谱法进行纯化，测定该果胶酶分子量最常用的方法是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。

（5）加样品时应严格按要求进行操作，吸管应贴着管壁，管口沿着管壁环绕移动，还应注意不要破坏凝胶面。正确的操作次序是③①④②。