Question

DNA和蛋白质是两种重要的生物大分子物质，它们在生物体的生命活动中发挥着重要的作用．请根据所学知识回答下列有关问题：
（1）关于DNA粗提取：
①DNA的粗提取过程中，需要去除DNA滤液中的杂质．可选择

 

溶液使DNA充分溶解，使杂质沉淀．
②将以上处理过后的滤液过滤，加入与滤液体积相等的、冷却的

 

溶液，静置2-3分钟，溶液中就会出现

 

，这就是粗提取的DNA．鉴定DNA时，可用

 

试剂，需用沸水浴加热5分钟，观察溶液是否会变为蓝色．
③若提取到的DNA含量过低，还可采用PCR技术进行扩增，PCR技术中用到的一种重要的酶是

 

．
（2）红细胞含有大量血红蛋白，常用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行提取和分离血红蛋白．
①血红蛋白的提取和分离一般可分四步：样品处理、

 

、

 

和纯度鉴定．
②实验前取新鲜的血液．取血后一般要在采血容器中预先加入柠檬酸钠，加入柠檬酸钠的目的是

 

．
③通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，该方法的原理是相对分子质量较小的蛋白质扩散进入凝胶内部的通道，通过凝胶柱的路程

 

，移动速度

 

；相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外移动，路程和移动速度刚好相反，相对分子质量不同的蛋白质分子因而得以分离．最后经

 

电泳进行纯度鉴定．

Answer 1

考点：DNA的粗提取和鉴定,蛋白质的提取和分离

专题：

分析：1、DNA的粗提取与鉴定的实验原理是：①DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同，利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出，从而达到分离的目的；①DNA不容易酒精溶液，细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离；③DNA对于酶、高温和洗涤剂的耐受性，蛋白酶能水解蛋白质，但是不能水解DNA，蛋白质不能耐受较高温度，DNA能耐受较高温度洗涤剂能瓦解细胞膜，但是对DNA没有影响；④在沸水浴的条件下DNA遇二苯胺会呈现蓝色．
2、血红蛋白的提取和分离一般的一般步骤是样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定，凝胶色谱法纯化蛋白质的原理是相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶柱时移动的速度不同，相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外移动，路程短，移动速度快，先被洗脱出来，相对分子质量较小的蛋白质扩散进入凝胶内部的通道，通过凝胶柱的路程长，移动速度慢，洗脱的次序靠后．

解答： 解：（1）①由于DNA在不同氯化钠溶液中的溶解度不同，因此可以选择适当浓度的氯化钠溶液使DNA充分溶解，使杂质沉淀或析出DNA使杂质溶解．
②将含有DNA的溶液，加入与滤液体积相等的、冷却的95%酒精后，静置一段时间，出现的白色丝状物为DNA分子，鉴定DNA分子的方法是用二苯胺试剂，水浴加热的条件下观察颜色变化，如果呈现蓝色说明白色丝状物是DNA分子．
③若提取到的DNA含量过低，还可采用PCR技术进行扩增，PCR技术需要用到耐高温的DNA聚合酶，如TapDNA聚合酶．
（2）①血红蛋白的提取和分离的步骤是：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定．
②为了防止血液凝固，取血后一般要在采血容器中预先加入柠檬酸钠．
③凝胶色谱法纯化蛋白质的原理是相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶柱时移动的速度不同，相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外移动，路程短，移动速度快，先被洗脱出来，相对分子质量较小的蛋白质扩散进入凝胶内部的通道，通过凝胶柱的路程长，移动速度慢，洗脱的次序靠后；血红蛋白的鉴定方法常用
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定．
故答案为：
（1）①适当浓度的氯化钠
②酒精    白色丝状物    二苯胺
③TapDNA聚合酶
（2）①粗分离   纯化  
②防止血液凝固
③较长   较慢   SDS-聚丙烯酰胺凝胶

点评：对于DNA粗提取和鉴定及血红蛋白的提取和分离实验的实验原理和具体操作步骤的掌握是本题考查的重点．