Question

【生物一生物技术实践】

尿素是一种高浓度氮肥且长期施用没有不良影响，但尿素只有通过土壤中某些细菌分解为氨后，才能被植物吸收利用。分解尿素的细菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解。

某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下：

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4·7H2O	蛋白胨	葡萄糖	尿素	琼脂
1.4g	2.1g	0.2g	1.0g	10.0g	1.0g	15.0g

   （1）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌?_____（能／不能），原因是__________________________________。

   （2）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用     法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的__________________就能大约推测出样品中活菌数。

   （3）初步分离脲酶通常用       法，如下图，试管中收集到的液体最先出现的是___________。鉴定分离出的脲酶纯化程度，一般采用_______法。

   （4）该同学设想：由活性脲酶和尿素混合，制成“加酶尿素"，尿素肥效一定更高。为了提高“加酶尿素"中脲酶的利用率，应当采用          技术。

Answer 1

（1）不能  培养基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能选择出只分解尿素为氮源的微生物

   （2）稀释涂布平板  菌落数目

   （3）凝胶色谱  相对分子质量较大的蛋白质 （凝胶）电泳

   （4）酶的固定化

解析:

考查分离土壤中分解尿素细菌。

选择分解尿素的细菌必须用尿素为唯一氮源的选择培养基；稀释涂布法常用来统计样品中活菌的数目；凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法；固定化酶技术在生产上的应用，这种酶的稳定性好，可以持续发挥作用。