我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出，这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答：
（
1）过程①和②必需用到的酶分别是________。（
2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是________。然后还要通过________技术来检测绿色荧光蛋白基因是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上。如果导入到植物细胞通常采用的方法则是________。（
3）为了获得更多的猪卵母细胞，可通过对母猪注射________，做超数排卵处理，并将所采集到的卵母细胞在体外培养到________期即可通过显微操作将其细胞核去除。（
4）在培养得到的重组细胞时，一般需要提供________条件。（至少说出3点）
千里马走向假期期末仿真试卷寒假系列答案科目：高中生物 来源：2014届甘肃秦安一中高三第一次检测生物卷（解析版） 题型：综合题
（共12分）下图表示我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的具体培育过程。
请据图回答下列问题：
(1)上述过程涉及的现代生物工程技术，属于分子水平的是___________，其核心步骤是______________________ 。
（2）构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的 处，DNA连接酶作用于 处。（填“a”或“b”）,b箭头指的的是 ，PCR过程断裂此键用 。
(3)若要获得单个的成纤维细胞进行培养，需用___________处理猪胚胎的部分组织。
(4)E过程中若要获得大量的卵母细胞需用___________激素处理成年母猪。
(5)H过程的名称是______ ___，所选择的胚胎一般处于_______ 期较合适。
(6)经过培养得到早期胚胎后可以用胚胎分割技术以获得更多基因型______ (相同/不相同)的转基因克隆猪胚胎，且在进行H过程之前，需要对代孕母猪进行___________处理，以给早期胚胎移入受体提供相同的生理环境。
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科目：高中生物 来源：2014届浙江省东阳市高三八月月考生物试卷 题型：综合题
下图表示我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的具体培育过程。
请据图回答下列问题：
(1)上述过程涉及的现代生物工程技术，属于分子水平的是___________，其核心步骤是_______________。
(2)若要获得单个的成纤维细胞进行培养，需用___________处理猪胚胎的部分组织。
(3)E过程中若要获得大量的卵母细胞需用___________激素处理成年母猪。
(4)H过程的名称是______ ___，所选择的胚胎一般处于_______ 期较合适。
(5)经过培养得到早期胚胎后可以用胚胎分割技术以获得更多基因型______ (相同/不相同)的转基因克隆猪胚胎，且在进行H过程之前，需要对代孕母猪进行___________处理，以给早期胚胎移入受体提供相同的生理环境。
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科目：高中生物 来源：2013届海南省高二下学期期中考试生物试卷（解析版） 题型：综合题
2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白（GFP）方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：
注：图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。
（1）在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来 ，理由是： 。
（2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多的方法是 。
（3）如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是 。获得的转基因克隆猪，可以解决的医学难题是，可以避免 。
（4）目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是： （用数字表示）。
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸
②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列
③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）
④表达出蓝色荧光蛋白。
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科目：高中生物 来源：2013届广东省连州市高二下学期期中考试生物试卷（解析版） 题型：综合题
日本下村修、美国沙尔菲和美籍华人钱永健因在研究绿色荧光蛋白(GFP)等方面的突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。下图为我国首例绿色荧光蛋白(GFP)转基因克隆猪的培育过程示意图。据图回答：
(1)图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性核酸内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性核酸内切酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC—，请画出质粒被限制酶I切割后所形成的黏性末端：__________________________________________________。
(2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是________________________________。
(3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是______________________________。
(4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是(用数字表示)________________________。
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸
②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列
③蓝色荧光蛋白基因的修饰(合成)
④表达出蓝色荧光蛋白
（5）若要在体外扩增绿色荧光蛋白基因可采用PCR技术。标准的PCR过程分为三个步骤，第一步是“变性”,这一步骤如果发生在细胞内，是在 的作用下完成的；第二步是退火；第三步是“延伸”，需要用到 酶。
(6)以上培育过程中应用到的生物技术有_________________________________________等。(至少答出三项)
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科目：高中生物 来源：2010-2011学年上海市嘉定区高三上学期第一次质量调研生物试卷 题型：综合题
分析回答有关生物工程中的问题：（8分）
日本下村修、美国沙尔菲和美籍华人钱永健因在研究绿色荧光蛋白（GFP）等方面的突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图．据图回答：
（1）绿色荧光蛋白基因在该实验中是做为________基因。图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性内切酶I的识别序列和切点是—G’GATCC—，请画出质粒被限制酶I切割所形成的黏性末端的过程：________________________
_________。
（2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是_______________ ___。
(3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是_______________________。
(4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是（用数字表示）：_______ ___ 。
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）④表达出蓝色荧光蛋白。
(5)在培养重组细胞时，培养液中通常含有_____________、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。
(6)以上培育过程中应用到的生物技术有_________________________________等（至少答出三项）。
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