Question

7．LB液体培养基和LB固体培养基是微生物实验室中较常用的一种培养基，其配方为10g蛋白胨、10g/L酵母提取物、5g/L氯化钠等，主要用于培养细菌、扩增菌种数量．某研究组开展了氧气对微生物生长、繁殖的影响实验，请回答下列问题：
（1）要配制供微生物生长、繁殖的培养基，其中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等．有些微生物对某些特殊营养物质及pH、氧气等条件有特殊要求．
（2）将各类微生物用接种环从斜面培养基接种于灭菌过的LB液体培养基中，进行扩大化培养．
（3）将含有LB固体培养基（LB液体培养基中加15g琼脂粉，刚配好，尚未凝固）的锥形瓶放入高压蒸汽灭菌锅中进行灭菌．灭菌完成后将锥形瓶取出，待温度下降到60℃（不烫手的温度）时，用酒精擦拭桌面和双手，在超净工作台中的酒精灯火焰旁将锥形瓶中的LB培养基分装到一系列试管，并做标记．
（4）当试管温度下降到40℃（培养基还是液态）时，用灭菌过的移液器吸取0.1mL的各类微生物悬液加入相应试管中并封口，双手快速搓动试管，使菌种均匀分布于培养基内后迅速将封口的试管放置在低温条件下使培养基凝固．
（5）将上述试管放置于常温条件下培养48小时后观察实验结果，如图中可表示制作果酒的菌种的分布图的是B．

Answer 1

分析 1、微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用．
2、无菌技术的主要内容：
①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；
②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌
③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触．

解答 解：（1）要配制供微生物生长、繁殖的培养基，其中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等．有些微生物对某些特殊营养物质及pH、氧气等条件有特殊要求．
（2）斜面培养基接种用接种环接种，对微生物进行扩大化培养．
（3）培养基一般采用高压蒸汽灭菌法灭菌．灭菌完成后将锥形瓶取出，待温度下降到60℃时，用酒精擦拭桌面和双手，在超净工作台中的酒精灯火焰旁将锥形瓶中的LB培养基分装到一系列试管，以防止杂菌污染．
（4）培养基凝固需要放置在低温条件下．
（5）参与果酒制作的菌种是酵母菌，其新陈代谢类型是异养兼性厌氧型，因此图中表示果酒制作菌种的图是B．
故答案为：
（1）水、碳源、氮源     pH、氧气
（2）接种环
（3）高压蒸汽灭菌锅   酒精   酒精灯火焰
（4）低温
（5）B

点评 本题结合图解，考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的成分，识记无菌技术及实例；识记参与果酒制作的微生物及其形成代谢类型，能结合所学的知识准确答题．