【题目】禾谷镰刀菌可侵染小麦等作物，使其产量和品质下降。研究者通过构建融合基因 Ve-FG 并转化拟南芥，以期实现转基因植物抗禾谷镰刀菌的目的。
（1）利用 PCR 技术，将野生番茄的抗黄萎病基因 Ve 与禾谷镰刀菌的识别基因 FG 进行重组，构建融合基因 Ve-FG（如图 1）。
① 设计 3 对引物。其中引物 2 的一部分序列与 C 片段一部分序列互补，另一部分序列与_____片段一部分序列互补。
② 通过 PCR 分别克隆A、C、P 片段。克隆 A 片段应选用的引物是_____。
③ 以 A、C、P 片段为_____进行延伸，将 A、P、C 片段拼接，再以引物 1、4 进行 PCR，扩增融合基因 Ve-FG。
（2）用_____将 Ve-FG 与质粒连接，构建重组质粒（如图 2，图中潮霉素抗性基因只在植物细胞中表达）。将农杆菌与重组质粒混合，一段时间后涂布到含有_____的平板培养基上进行筛选。用含重组质粒的农杆菌转化拟南芥，几周后收获种子，种在含有潮霉素的培养基上，获得转基因拟南芥株系 1 和株系 2。
（3）分别提取株系 1 和 2、非转基因拟南芥植株叶片中的 DNA 作为模板，PCR 扩增 Ve-FG 基因后进行电泳，结果如图 3。
① 电泳时应以_____为阳性对照。
② 成功导入 Ve-FG 基因的是_____。
③ 株系 1 可抗潮霉素，但电泳结果无阳性条带，原因可能是_____。
（4）为检验融合基因 Ve-FG 的功能，以导入 Ve-FG 基因的植株为实验组，导入空白质粒的植株为对照组，分别接种_____。一段时间后观察发现，与对照植株相比，实验组整体长势更旺盛，叶片萎蔫程度、叶片变黄程度也较轻，这表明_____。
【答案】P 1、3 模板 DNA连接酶 卡那霉素 融合基因 Ve-FG 株系 2 株系1中导入的是空白质粒，应空白质粒中也含有上述的两种抗性基因 禾谷镰刀菌 转基因拟南芥中的Ve-FG基因在拟南芥细胞中成功表达。
【解析】
PCR一般要经历三十多次循环，每次循环可分为变性、复性、延伸三步。在循环之前，常需要进行一次预变性，以便增加大分子模板DNA彻底变性的概率。PCR过程为:变性，当温度上升到90 ℃以上时，氢键断裂，双链DNA解旋为单链。复性，当温度降低到50℃左右是，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。延伸，温度上升到72 ℃左右，溶液中的四种脱氧核苷酸，在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。
（1）① 设计 3 对引物。其中引物 2 的一部分序列与 C 片段一部分序列互补，另一部分序列与P片段一部分序列互补，才能实现图示的连接。
② 通过 PCR 分别克隆A、C、P 片段。选用的引物1、3可完成A 片段的克隆。
③ 以 A、C、P 片段为模板进行延伸，将 A、P、C 片段拼接，再以引物 1、4 进行 PCR，扩增融合基因 Ve-FG。
（2）用DNA连接酶将 Ve-FG 与质粒连接，构建重组质粒（如图 2）。将农杆菌与重组质粒混合，由于 重组质粒中含有抗卡那霉素的基因和潮霉素抗性基因，但是潮霉素抗性基因只在植物细胞中表达，因此，一段时间后将农杆菌涂布到含有卡那霉素的平板培养基上进行筛选，从而将经过转化的农杆菌筛选出来。用含重组质粒的农杆菌转化拟南芥，几周后收获种子，种在含有潮霉素的培养基上，从而将含有重组质粒的拟南芥株系 1 和株系 2筛选出来。
（3）分别提取株系 1 和 2、非转基因拟南芥植株叶片中的 DNA 作为模板，PCR 扩增 Ve-FG 基因后进行电泳，结果如图 3。
① 电泳时应以融合基因 Ve-FG为阳性对照。
② 成功导入 Ve-FG 基因的是株系2。
③ 株系 1 可抗潮霉素，但电泳结果无阳性条带，原因可能是株系1导入的是空白质粒，从而不能急检测到目的基因。
（4）为检验融合基因 Ve-FG 的功能，以导入 Ve-FG 基因的植株为实验组，导入空白质粒的植株为对照组，分别接种禾谷镰刀菌。一段时间后观察发现，与对照植株相比，实验组整体长势更旺盛，叶片萎蔫程度、叶片变黄程度也较轻，这表明导入的Ve-FG基因在拟南芥细胞中成功表达。
小学学习好帮手系列答案
小学同步三练核心密卷系列答案科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】甲、乙、丙三人在一次社区健康日活动中检测出尿糖超标，为进一步弄清是否患糖尿病，依据规范又进行了血液检测。图1、图2所示为空腹及餐后测定的血糖及胰岛素浓度。糖尿病血糖浓度标准为：空腹≥7．0mmol/L，餐后2h≥11．1mmol/L，请回答下列问题：
（l）正常人进食后血糖浓度上升，胰岛素分泌增多。胰岛素可促进血糖进入细胞内氧化分解供能，合成糖原或转变为非糖物质，并抑制_________；同时胰岛A细胞分泌_____受抑制，使血糖浓度下降。
（2）据图初步判断______是糖尿病患者，需复查血糖。患者常因血糖浓度升高致细胞外液渗透压升高，______ 产生渴感，表现为多饮。
（3）除糖尿病外，尿糖超标的原因还可能有______（填序号）。
①一次性摄糖过多②低血糖患者③抗利尿激素分泌不足④肾小管重吸收功能障碍
（4）结合图1、图2分析，乙出现上述检测结果的原因可能有______（填序号）。
①自身抗体与胰岛素结合②自身效应 T细胞持续杀伤胰岛B细胞
③自身抗体竞争性结合靶细胞膜上的胰岛素受体④胰岛 B细胞膜上载体对葡萄糖的转运能力下降
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【题目】某性别决定为XY型的昆虫，红眼与朱红眼受等位基因A/a控制，有眼与无眼受等位基因B/b控制，其中有一对基因位于性染色体上，且存在两对隐性基因纯合致死现象。亲代与F1的表现型如下表。下列有关分析错误的是（ ）
亲代 | 红眼♀ | 朱红眼♂ | |
| ♀ | 红眼 | 无眼 |
♂ | 红眼 | ||
A.红眼对朱红眼为显性，无眼对有眼为隐性
B.控制有眼和无眼的基因位于X、Y染色体的同源区上
C.F1雌性个体中红眼与无眼的比例为1∶1
D.可用测交的方法验证F1红眼雄性个体的基因型
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【题目】血糖是人体各组织细胞所需能量的主要来源，胰岛素对血糖的平衡发挥重要作用。图一为胰岛素降低血糖浓度的部分作用机理模式图（糖尿病病因之一是患者体内存在甲、乙、丙的异常抗体）。给人静脉注射不同剂量的胰岛素，测得血糖的补充速率和消耗速率如图二所示。下列分析 错误的是（ ）
A.胰岛β细胞分泌的胰岛素通过体液运送到肝细胞
B.曲线 b 的上升是胰岛素作用于肝脏、肌肉等细胞的结果
C.当胰岛素浓度为 40μU/mL 时，在较长时间内血糖浓度可维持相对稳定
D.体内出现丙的异常抗体的糖尿病患者无法通过注射胰岛素的方式取得疗效
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【题目】水稻 R 基因的等位基因 R1与 R2 存在一个碱基对的差异，为检测水稻的基因型，使用存在 1 个碱基错配的引物对 3 株水稻的 R 基因局部进行 PCR 扩增后，用限制酶 HinfⅠ切割并电泳（如下图）。下列相关叙述错误的是（ ）
A.在 R1基因和 R2基因的差异序列中，不含限制酶 HinfⅠ的酶切位点
B.引物中存在 1 个碱基错配，导致 R 基因经 PCR 扩增后 1 个碱基对改变
C.扩增后的R2片段有 1 个 HinfⅠ的酶切位点，而扩增后的 R1 片段没有
D.电泳结果显示，植株 1 为纯合子，植株 2 和植株 3 为杂合子
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【题目】某实验小组探究一定浓度的萘乙酸（NAA）溶液和细胞分裂素（KT）溶液对棉花主根长度及侧根数的影响，所得结果如图所示。下列相关叙述或推理合理的是（ ）
A.由甲组数据可知，没有激素的调节棉花根也能生长
B.乙组与甲组和丙组可分别构成对比实验和对照实验
C.NAA和KT对棉花主根的顶端优势的作用有协同作用
D.若去除丁组棉花的主根，则棉花的侧根数可能会增多
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【题目】用甲、乙两组小鼠做实验，研究一种疫苗对于预防感染的有效性。如下图为该实验的某些步骤，有关该实验的说法错误的是（ ）
A.a可表示将病毒进行脱毒或减毒处理制成疫苗
B.b表示将疫苗注射给乙组小鼠，c表示乙组小鼠再感染该病毒
C.c和d构成一组对照实验，可用于判断疫苗的有效性
D.若乙组小鼠获得了对病毒的免疫能力，这与浆细胞能保持对抗原的长期记忆有关
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【题目】促肾上腺皮质激素是垂体分泌的一种多肽类激素，它的合成和分泌过程如图所示。下列说法不正确的是（ ）
A.图中①代表内质网，②代表高尔基体，③可代表线粒体
B.该激素分泌到细胞外共穿过0层磷脂双分子层
C.该激素的分泌过程体现了生物膜具有一定流动性的特点
D.②内连核膜，外连细胞膜，是细胞核和细胞膜间物质运输的通道
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【题目】将健康的幼苗置于含适宜浓度CO2缓冲液、水分充足的环境中，装置如图1所示，分别在15℃、25℃和35℃，改变光照强度，测定的CO2吸收速率如图2，请回答下列问题：
（1）若要测定图2中D点的CO2吸收速率，应将图1装置置于_______条件下。在35℃、相对光照强度为8的条件下，图1装置中液滴会发生_______（填“左移”、“右移”或“不变”），原因是________________。
（2）图2中D点时，该植物叶肉细胞产生ATP的场所有______________。当光照强度大于12时，25℃与15℃条件下有机物的合成速率分别为M1、M2，结果应为M1_______M2（填“>”、“<”或“=”）。
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