Question

2．某高校研发的幽门螺杆菌疫苗为基因工程疫苗，对该菌引发的胃炎、胃溃疡等疾病具有较好的预防效果，其有效成分是一种该菌表面抗原蛋白质，请回答下列问题．
（1）根据表面抗原蛋白质的氨基酸序列推测出目的基因的脱氧核苷酸序列，进行人工合成，然后通过PCR技术大量扩增．
（2）基因工程的核心步骤是构建基因表达的载体．其中标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．
（3）目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化．在表达过程中，启动子需与RNA聚合酶识和结合，从而驱动转录过程．最终翻译是否成功，常用的检测方法是抗原-抗体杂交．
（4）实验证明，一定时间内间隔口服该疫苗3次效果更好，其主要原因是体内产生的记忆细胞数量增多，导致获得的免疫预防作用更强，持续时间更久．

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）采用人工合成法获得目的基因时，可根据表面抗原蛋白质的氨基酸序列推测出目的基因的脱氧核苷酸序列，进行人工合成，然后通过PCR技术大量扩增．
（2）基因工程的核心步骤是构建基因表达的载体．其中标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．
（3）目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化．在表达过程中，启动子需与RNA聚合酶识和结合，从而驱动转录过程．翻译的产物是蛋白质，因此检测翻译是否成功，常用抗原-抗体杂交法．
（4）实验证明，一定时间内间隔口服该疫苗3次效果更好，其主要原因是体内产生的记忆细胞数量增多，导致获得的免疫预防作用更强，持续时间更久．
故答案为：
（1）脱氧核苷酸序列      PCR
（2）构建基因表达的载体      鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来　
（3）转化      RNA 聚合酶         抗原-抗体杂交
（4）记忆

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作工具、操作步骤及相关细节，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记层次的考查．