Question

下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点。

下图是转基因抗病香蕉的培育过程，含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：

(1) 用图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaI酶切割，原因是__________________________________________。

(2) 构建含目的基因的重组质粒A时，选 用 BamhHI 和HindⅢ酶对_______和 _______进行切割，可以防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化。

(3) ①?⑤中存在碱基互补配对的是____________。

(4) 香蕉组织细胞具有__________，因此，可以利用组织培养技术将导入目的(抗病)基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中④、⑤依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的_________、____________。培养皿中的培养基除添加营养物质外，还需要添加_________和__________以诱导外植体完成④、⑤生理过程，培养成完整的植物体。在形成愈伤组织的过程中，细胞的新陈代谢类型是_____________。

(5) 如何检测图示过程最终是否取得成功？____________________________。

 

Answer 1

【答案】

（1）SmaI酶会破坏质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因（2）外源DNA和质粒（3）①④⑤  （4）全能性 脱分化 再分化 生长素 细胞分裂素   异养需氧型（5）用虫子感染转基因香蕉，观察是否抗虫

【解析】

试题分析：

（1）质粒抗生素抗性基因为标记基因，由图可知，标记基因和外源DNA目的基因中均含有SmaI酶切位点，都可以被SmaI酶破环，故不能使用该酶剪切质粒和含有目的基因的DNA。

(2) 构建含目的基因的重组质粒A时，选用 BamhHI 和HindⅢ酶对外源DNA和质粒进行切割，这样使目的基因两端的黏性末端不同，可以防止含目的基因的外源DNA片段自身环化，同理，也可以防止质粒自身环化。

(3)— (4)图中①是构建基因表达载体，存在碱基互补配对；②③是利用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞，不存在碱基互补配对；④和⑤表示植物组织培养，原理是香蕉组织细胞具有全能性，其中④表示脱分化，⑤表示再分化，这两个过程都在进行有丝分裂，所有都存在碱基互补配对；培养皿中的培养基除添加营养物质外，还需要添加生长素和细胞分裂素。在形成愈伤组织的过程中，细胞的新陈代谢类型是异养需氧型。故①?⑤中存在碱基互补配对的是①④⑤。

(5)可以从个体水平鉴定图示过程最终是否取得成功，其鉴定方法为：用虫子感染转基因香蕉，观察是否抗虫。

考点：本题考查基因工程和植物组织培养的相关知识。

点评：本题以抗病香蕉味素材，考查基因工程和植物组织培养的相关知识，意在考查考生的理解能力、识记能力和应用能力。