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【题目】白细胞介素是一类淋巴因子。研究人员将人白细胞介素的基因导入到酵母菌细胞中,使其分泌出有活性的白细胞介素。

(1)为增加白细胞介素基因的数量,可使用___________________技术,但前提是必须知道该基因的部

分核苷酸序列,以便根据这一序列合成_________________

(2)为便于鉴别受体细胞中是否含有外源基因,携带外源基因的质粒上应有___________,还应有____________________,以利于外源基因的表达。

(3)在重组载体导入酵母菌细胞之前,需用_____________处理酵母菌细胞,白细胞介素基因进入酵母菌细胞内,并且在其细胞内维持稳定和表达的过程,称为_________。在表达过程中,启动子需与____________________识别和结合,从而驱动转录过程。

(4)为了能成功表达出白细胞介素,不使用细菌,而使用酵母菌细胞作为受体细胞,可能原因是_____________________

【答案】 PCR 设计引物 标记基因 启动子和终止子 Ca2+ 转化 RNA聚合酶 细菌细胞中无内质网和高尔基体等加工白细胞介素的细胞器

【解析】试题分析:分析题图,图示表示基因表达载体的构建过程,载体和目的基因都有限制酶EcoRⅠ与EcoR52的切割位点,所以切割载体和目的基因时用限制酶EcoRⅠ与EcoR52,再用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组载体。

(1)基因工程中,常用PCR技术扩增目的基因,但前提是必须知道基因的已知序列,以便设计引物。

(2)基因表达载体上的标记基因可以用于是否导入目的基因的检测;此外还应该有启动子和终止子,以便外源基因的表达。

(3)在重组载体导入酵母菌细胞之前,需用Ca2+处理酵母菌,使酵母菌称为感受态细胞,白细胞介素基因进入酵母菌细胞内,并且在其细胞内维持稳定和表达的过程,称为转化。在表达过程中,启动子需与RNA聚合酶识别和结合,从而驱动转录过程。

(4)由于细菌属于原核生物,细胞中无内质网和高尔基体等加工白细胞介素的细胞器,因此为了能成功表达出白细胞介素,不使用细菌,而应该使用酵母细胞作为受体细胞。

练习册系列答案
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