Question

【题目】在植物的生态环境中，存在着各种各样的微生物，它们有的附着于植物表面，有的则生活于植物体内。有资料显示，一些植物内生微生物与宿主发生关联时，可明显增强宿主的抗病性，提高植物的生产力．以下为从菠菜叶中分离内生细菌，筛选出对菠菜枯萎病菌有拮抗作用的菌株的过程。

（步骤一 菠菜叶内生细菌的分裂）

（1）取0.1g菠菜叶，经70%酒精和0.2%升汞进行消毒后，接种于培养基上．培养48h后，没有观察到菌落．这说明_____．

A．菠菜叶表面微生物已被杀死 B．菠菜叶内在微生物已被杀死

C．菠菜叶内不存在内在细菌 D．菠菜叶细胞已被全部杀死

（2）将上述0.1g菠菜叶放入无菌研钵中，加入一定量的水，研磨成匀浆．此过程中的水应是_____。

A．蒸馏水 B．自来水 C．无菌水 D．纯净水

（3）将菠菜叶研磨液接种至培养基上，30℃黑暗培养48h获得菌落．为进一步获得单菌落，挑出形态大小有差异的菌落，可采用_____法接种在_____培养基上纯化培养。

（步骤二 菠菜枯萎病毒拮抗菌株的筛选）

（4）在平板培养基中央接种入菠菜枯萎病菌菌块，在四个点各接种入一小环单菌落菌株，同时设置对照，如图.28℃黑暗培养3d，观察发现对照平板上长满菠菜枯萎病菌，而实验平板上的单菌落菌株周围出现透明圈．此现象说明_____。

（步骤三 菠菜叶内生细菌种类的鉴定）

（5）对单菌落菌株进行生理生化鉴定，确定菌种为一种芽孢杆菌．以下可能是该菌种特征的是_____．

A．有菌盖 B．有质膜 C．能形成荚膜 D．严格厌氧 E．可能存在抗利福平基因

Answer 1

【答案】A C 划线法 固体 单菌落菌株对菠菜枯萎病菌有拮抗作用 BCE

【解析】

菌落是由单个细菌（或其他微生物）细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见的子细胞群落；因为每一种细菌在一定条件下形成固定的菌落特征，包括菌落的大小、形状、边缘、光泽、质地、颜色和透明程度等。不同种或同种在不同的培养条件下，菌落特征是不同的。

（1）根据题意可知培养48h后，没有观察到菌落，说明经70%酒精和0.2%升汞进行消毒后，菠菜叶表面微生物已被杀死了。

故选A。

（2）为了控制无菌条件，应该用无菌水。

故选C。

（3）为进一步获得单菌落，一般采用在固体培养基进行平板划线法的接种方法。

（4）在实验平板上的单菌落菌株周围出现透明圈说明了单菌落菌株对菠菜枯萎病菌有拮抗作用。

（5）芽孢杆菌有质膜；能形成荚膜；可能存在抗利福平基因，具有抗利福平的能力。

故选BCE。