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    2．如表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了质粒和目的基因中相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶不重复标注．请回答下列问题：
    限制酶BamHⅠBclⅠSau3AⅠHindⅢ
    识别序列及切割位点

    （1）质粒载体作为基因工程的工具，应具有的基本条件有具有标记基因、具有一个或多个限制酶切点、能在受体细胞中复制并稳定保存（答出两点即可），而作为基因表达载体，除了满足上述基本条件外，还需具有启动子和终止子．
    （2）根据表格分析，经BamHⅠ酶切后得到的DNA片段不可以（“可以”或“不可以”）与经HindⅢ酶切后的产物连接，理由是产生的粘性末端不同．
    （3）用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用两种限制酶切割，即BelⅠ酶和HindⅢ．酶切后的载体和目的基因片段，通过DNA连接酶酶作用后获得重组质粒．为了扩增重组质粒，需将其转入处于感受态的大肠杆菌．
    （4）转入了重组质粒的大肠杆菌可在添加了四环素的培养基表面长出菌落．若用PCR鉴定，所用的引物组成为图2中引物甲和引物丙．

    分析 基因工程技术的基本步骤：
    1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
    2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
    3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
    4、目的基因的检测与鉴定：
    （1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．
    （2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

    解答 解：（1）质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有具有标记基因、具有一个或多个限制酶切点、能在受体细胞中复制并稳定保存．
    （2）根据表格分析，经BamHⅠ酶切后得到的DNA片段不可以与经HindⅢ酶切后的产物连接，理由是产生的粘性末端不同．
    （3）选择的限制酶应在目的基因两端存在识别位点，但BamHⅠ可能使质粒中的启动子丢失，因此只能选BelI和HindⅢ两种限制酶切割．酶切后的载体和目的基因片段，通过连接酶作用后获得重组质粒．为了扩增重组质粒，需将其转入处于感受态的大肠杆菌．
    （4）为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，根据质粒上的抗性基因，应在筛选平板培养基中添加四环素．PCR技术要求两种引物分别和目的基因的两条单链结合，沿相反的方向合成子链，故所用的引物组成为图2中引物甲和引物丙．
    故答案为：
    （1）具有标记基因、具有一个或多个限制酶切点、能在受体细胞中复制并稳定保存
    （2）不可以  产生的粘性末端不同
    （3）HindⅢDNA连接酶  感受
    （4）四环素  引物甲和引物丙

    点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤的相关细节，能结合所学的知识准确答题，属于考纲应用和理解层次的考查．

    练习册系列答案
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    植物甲具有极强的耐旱性，其耐旱性与某个基因有关。若从该植物中获得该耐旱基因，并将其转移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性。回答下列问题：

    （1）理论上，基因组文库含有生物的 基因；而cDNA文库中含有生物的 基因。

    （2）若要从植物甲中获得耐旱基因，可首先建立该植物的基因组文库，从中筛选出所需的耐旱基因是比较复杂的事情，简单的说就是根据。

    （3）将耐旱基因导入农杆菌，并通过农杆菌转化法将其导入植物 （甲/乙）的体细胞中，经过一系列的过程得到再生植株。要确认该耐旱基因是否在再生植株中翻译出蛋白质，应用相应的进行抗原-抗体杂交，如果检测结果呈阳性，再在田间试验中从 水平检测再生植株的 是否得到提高。

    （4）假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交，子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为3∶1时，则可推测该耐旱基因整合到了 （填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”）。

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    14．回答下列有关温度与酶活性的问题：
    （1）温度对唾液淀粉酶活性影响的实验：
    将盛有2mL唾液淀粉酶溶液的试管和盛有2mL可溶性淀粉溶液的试管编为一组，共四组，在0℃、20℃、37℃和100℃水浴中各放人一组，维持各自的温度5min．然后，将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中，摇匀后继续放回原来的温度下保温，把淀粉酶与淀粉溶液混合的时间作为本实验的起始时间记录下来．再每隔一分钟，取一滴混合液滴在盛有碘液的点滴板上进行观察，记录每种混合液蓝色消失的时间．通过比较混合液中淀粉消失所需时间的长短来推知酶的活性．预计100℃温度下混合液因其中的酶失去活性蓝色不会消失．
    （2）温度对酶活性的影响主要体现在两个方面：其一，随温度的升高会使反应物和酶接触的机会增多，反应速率变快；其二，因为大多数酶是蛋白质，随温度升高分子结构会发生改变，温度升到一定程度，酶将完全失活．这两种作用叠加在一起，使酶促反应在某一温度下最快，这一温度就是该酶的最适温度．
    （3）科研人员通过蛋白质工程来设计改变酶的构象．在研究溶菌酶的过程中得到了多种突变酶，测得酶50%发生变性时的温度（Tm），部分结果见表：
    酶半胱氨酸（Cys）的位置和数目二硫键数目Tm/℃
    野生型T4溶菌酶Cys51，Cys97无41.9
    突变酶CCys21，Cys143152.9
    突变酶FCys3，Cys9，Cys21，Cys142，Cys164365.5
    （注：Cys右上角的数字表示半胱氨酸在肽链中的位置）
    溶菌酶热稳定性的提高，是通过改变半胱氨酸的位置和数目和增加二硫键的数目得以实现的．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    11．关于人类21-三体综合征的叙述中正确的是（　　）
    A．患该病的个体的体细胞中往往都存在致病基因
    B．可通过羊水检查来初步判断胎儿是否患该病
    C．可观察体细胞分裂时联会的情况来判断是否三体
    D．患者结婚后所生的后代均患该病

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    17．如图实验，甲、乙、丙切去顶芽，丁不切顶芽．将切下的丙顶芽放置在琼脂块上一段时间后，再将琼脂块置于丙切口上，乙切口放空白琼脂块，甲切口不放任何东西．下列对实验结果预测不合理的是（　　）
    A．最先发育成侧枝的是侧芽1B．丙的主枝将直立生长
    C．能弯向光源生长的只有丁D．5号侧芽比4号侧芽先发育成枝条

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    7．下列有关细胞分化、凋亡和衰老的说法正确的是（　　）
    A．细胞分化可以使细胞的种类和数量增加
    B．细胞分化发生在胚胎期，细胞衰老与凋亡发生在老年期
    C．被病原体感染的细胞的清除，属于细胞凋亡
    D．细胞衰老后死亡属于细胞坏死

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    （2）A图中能形成二个四分体，含8个染色单体．
    （3）B图细胞分裂完成后，形成的子细胞是卵细胞和第二极体．

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