Question

18．某小组欲进行胚胎干细胞（ES细胞）的一系列研究．请回答：
（1）ES细胞能分化出成体动物的所有组织和器官，这体现了ES细胞的发育全能性．为获得适合人体移植的猪器官，减弱或消除排斥反应，可对ES细胞进行基因敲除．
（2）一个ES细胞变成ES细胞群的过程中，细胞可能（填“可能”、“不可能”）出现接触抑制现象．下列关于动物细胞培养和核移植的叙述，正确的是D．
A．从原代培养物或细胞系中选择和纯化无法获得细胞株
B．动物细胞培养基中添加胰岛素的目的是调节血糖浓度
C．胚胎干细胞培养时，加滋养层是为了抑制胚胎干细胞分化
D．核移植形成的重组细胞在初次分裂时核基因不转录
（3）为获得含兔褐毛基因的转基因小鼠，可将褐毛基因通过显微注射法导入ES细胞核中，再将该核移植到去核的卵细胞中，经过胚激活、胚胎培养、胚胎移植，最终由代孕母鼠产下克隆小鼠．
（4）为获得大量的上述克隆小鼠，可用转基因的小鼠胚胎成纤维细胞进行体细胞克隆．因为含有褐毛基因的胚胎成纤维细胞可进行传代培养，理论上可获得无限个转基因小鼠．

Answer 1

分析 1、细胞株和细胞系：
细胞株：原代培养细胞传至10代左右就不容易传下去，细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞能存活传到40～50代，这部分细胞称为细胞株．
细胞系：细胞株传到50代左右不能再继续传代，部分细胞遗传物质改变，具有癌变细胞的特点，可以在培养条件下无限制的传代下去，这部分细胞称为细胞系．
2、胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团）．胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性，体积较小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物任何一种组织细胞．另一方面，在体外培养条件下，ES细胞可不断增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可以进行某些遗传改造．

解答 解：（1）ES细胞具有发育全能性，能分化出成体动物的所有组织和器官．为获得适合人体移植的猪器官，减弱或消除排斥反应，可对ES细胞进行基因敲除，即改变抗原决定簇基因，使其功能丧失．
（2）ES细胞是正常体细胞，其分裂形成细胞群的过程中，若不发生基因突变，则会出现接触抑制现象，若发生基因突变，则可能不会出现接触抑制现象．
A、“从一个经过生物学鉴定的细胞系或原代培养物用单细胞分离培养或通过筛选的方法，克隆具有特殊性质或标志的单细胞获得的细胞群，呈细胞株”，A错误；
B、胰岛素的作用是降低血糖，而动物细胞培养不需要调节血糖浓度，B错误；
C、胚胎干细胞培养时，加饲养层是为了抑制胚胎干细胞分化，C错误；
D、核移植形成的重组细胞分裂的准备在重组前已完成，在初次分裂时核基因不转录，D正确．
故选：D．
（3）培育转基因动物时，导入目的基因最有效的方法是显微注射法，因此为获得含兔褐毛基因的转基因小鼠，可将褐毛基因通过显微注射法导入ES细胞核中，再将该核移植到去核的卵细胞中，经过胚激活、胚胎培养、胚胎移植，最终由代孕母鼠产下克隆小鼠．
（4）为获得大量的上述克隆小鼠，可用转基因的小鼠胚胎成纤维细胞进行体细胞克隆．因为含有褐毛基因的胚胎成纤维细胞可进行传代培养，理论上可获得无限个转基因小鼠．
故答案为：
（1）发育全能性          基因敲除
（2）可能      D
（3）显微注射       胚激活      
（4）传代

点评 本题考查动物细胞培养和胚胎干细胞的相关知识，要求考生识记动物细胞培养的过程；识记胚胎干细胞的特点及应用，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．