Question

【题目】某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、Bam_HI三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因．利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示，请回答下列问题．
（1）在构建重组质粒时，应选用和两种限制酶对进行切割，然后进行连接，以保证重组DNA序列的唯一性．
（2）为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，应在培养基中加 ， 理由是 ．
（3）将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用技术，即通过和两个主要过程最终形成完整植株．

Answer 1

【答案】
（1）SalⅠ； HindⅢ；质粒和抗盐基因的DNA
（2）氨苄青霉素；重组质粒中含抗氨苄青霉素基因而抗四环素基因被破坏
（3）植物组织培养；脱分化；再分化
【解析】解：（1）质粒和含有目的基因的外源DNA分子上都含有SalI、Hindm、BamHI三种限制酶切割位点，其中BamHI的切割位点位于目的基因上，用该酶切割会破坏目的基因；若只用SalI一种限制酶切割可能会导致目的基因与运载体反向连接；因此在构建重组质粒时，应选用SalI和HindIII两种限制酶对质粒和抗盐基因进行切割，然后进行连接，以保证重组DNA序列的唯一性．（2）选用SalI、HindIII两种酶对质粒进行切割时，形成的重组质粒中含抗氨苄青霉基因而抗四环素基因被破坏，为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，应在培养基中加入氨苄青霉素．（3）将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用植物组织培养技术，即通过 脱分化和再分化 两个主要过程最终形成完整植株．

所以答案是：（1）SalⅠHindⅢ质粒和抗盐基因的DNA （2）氨苄青霉素 重组质粒中含抗氨苄青霉素基因而抗四环素基因被破坏（3）植物组织培养 脱分化 再分化

【考点精析】本题主要考查了基因工程的原理及技术的相关知识点，需要掌握基因工程的原理是利用DNA重组技术才能正确解答此题．